非水介质酶促方法与含糖化合物合成研究化学专业论文.docxVIP

摘 摘 要 论文研究了非水相酶促方法合成可聚合糖乙烯酯及含糖聚合物，用‘H-NMR， ”C-NMIR’FTIIe MS以及GPC等进行表征。主要包括单糖、二糖、三糖以及抗病毒 药物阿昔洛韦的多种新型乙烯酯衍生物的有机相酶催化选择性合成，及糖乙烯酯为 单体的含糖聚合物的制备与表征，论文还考察了各种因索对酶促糖酰化反应的影响。 (一)在糖乙烯酯衍生物的有机相酶促合成研究中，我们比较系统的研究了单 糖(葡萄糖、甘露糖、半乳糖)，二糖(蔗糖、乳糖、麦芽糖)，三糖(棉子糖)与 具有不同链长的丁、己、癸二酸二乙烯酯以及醋酸乙烯酯、丙烯酸酯在无水吡啶中 用枯草杆菌碱性蛋白酶催化的酯交换反应，以高区域选择性、较高的产率合成了新 型的可聚合糖乙烯脂肪酸衍生物；用1H-NMR 13C-NMP,，FTIR,ESI-MS等分析手段 对合成产物进行表征，并确证它们的结构。 枯草杆菌碱性蛋白酶对于选用的各种底物都体现了较高的催化活性和区域选择 性。葡萄糖、甘露糖、半乳糖都在6位伯羟基上高选择性酰化。在二糖底物中，蔗 糖在l’．OH位上酰化；乳糖在6-OH位上酰化；麦芽糖也在6-OH位上酰化。对于 棉子糖(三糖)底物，主要在D．呋喃果糖残基的c—l位上酯化。 枯草杆菌碱性蛋白酶对于糖的伍、B差向异构体还具有较高的酯化立体选择性。 其中，葡萄糖与己二酸二乙烯酯、癸二酸二乙烯酯反应产物，半乳糖与丁、己、癸 二酸二乙烯酯反应产物，以及乳糖与己、癸二酸二乙烯酯反应产物都是纯伍构型的。 研究发现酶对于糖差向异构体的立体选择性受到酰基供体链长的强烈影响。根据Gc 测定结果，从乙酯到癸二酯随着链长增加，葡萄糖酯、甘露糖酯的a、B差向异构体 比例也逐渐增大。 论文还研究了抗病毒药物阿昔洛韦的酶促区域选择性酯化，高效选择制备了可 聚合的阿昔洛韦乙烯酯衍生物。本论文共合成了26个乙烯酯衍生物，其中23个是 尚未见文献报导的新衍生物。 (--)在非水相酶催化反应的影响因素探讨中，论文考察了不同酶源、反应溶 剂、溶剂含水量、反应温度、反应时间、反应底物、酸，糖摩尔比例、酶量等因素对 酶促糖酰化反应的转化率、产率、选择性的影响。 1)酶源：本文选择了7种商业酶作为催化剂，考察它们在无水吡啶溶剂中催化 葡萄糖、半乳糖、甘露糖、蔗糖、棉予糖与二酸二乙烯酯的酯交换反应活性。酶筛 选结果表明不同来源的酶对同一种糖的酯交换反应的催化活性是不一样的，而且同 I 术毫吖F糟、、鲁卿闯誓 一种酶对于不同糖的催化活性也是有差别的。 一种酶对于不同糖的催化活性也是有差别的。 2)反应溶剂：选择了19种具有不同Log P值的溶剂，考察枯草杆菌碱性蛋白酶 的催化活性与溶剂性质的关系。研究发现溶剂与酶催化活性之间的关系并不完全符 合Laane等人提出的“logP规则”。枯草杆菌碱性蛋白酶在强极性溶剂吡啶、DMF 中都具有较高的催化活性，其中吡啶的催化活性最高。在其他强极性溶剂中催化活 性都比较差。随着溶剂疏水常数的增大，非极性增强，枯草杆菌碱性蛋白酶的催化 活性与极性溶剂中相比也有所提高。但是在非极性溶剂中酶催化糖酰化的活性受到 糖溶解性差的限制。 3)溶剂含水量：毗啶含水量对枯草杆菌碱性蛋白酶的催化活性有显著影响，其 最适水含量为0．3％。反应介质的含水量对酶的选择性也有很大的影响。在葡萄糖与 己二酸二乙烯酯的酯交换反应中，随着吡啶含水量的增加，枯草杆菌碱性蛋白酶的 酯化区域选择性明显下降。当吡啶含水量从O％增大到3％时，对葡萄糖6位羟基的 选择性从95％下降到～50％左右。 4)反应温度：在16～80。C范围内，枯草杆菌碱性蛋白酶在吡啶中催化的最适温 度是50℃。 5)反应时间：随着反应时间延长，糖酯交换反应转化率逐渐增大，然后趋于平 衡，葡萄糖、甘露糖、半乳糖、蔗糖、棉子糖等与各种酰基供体反应都存在一个平 衡转化反应时间，这个时间因糖不同、酰基供体不同而不同。 6)反应底物：在五种不同链长、不同种类的酰基供体中，丁二酸二乙烯酯的反 应速率最快。不同链长的二酸--K,烯酯来比较，随着碳链增长，酯化反应的活性下 降，达到平衡转化的时间增长，而且平衡转化率降低。同一种酰基供体与不同糖反 应的活性也有区别。 7)酸／糖摩尔比例：酸／糖摩尔比例通过反应平衡而对反应转化率产生影响。高 的酸／糖摩尔比例能获得更高的糖转化率和糖酯产率。 8)酶量：酶量在0--50mg／ml范围内，反应转化率随着酶量线性增加，此后随 着酶量增大，转化率的增加幅度也逐渐减小，酶量达到150mg／ml后转化率接近100 ％。任何一个反应的最佳酶量都与众多因素有关。 (三)在糖乙烯酯单体的聚合以及含糖聚合物的表征研究中，考察了偶氮类、 过氧化物类、氧化还原类引发剂的引发效果，选择K2s208／H202／FeS04作为引发剂