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法舒地尔对兔股静脉移植物内膜增厚作用的实验研究外科学专业论文
河北医科大学
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研究生签名:掷占乐导师签名: 学院领导签名:冽
承担相应的法律责任。
◇它年3月28日
河北医科大学 研究生学位论文独创性声明
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研究生签名:墨P占t哥,导师签名:
D s年3 月zP日
中文摘要法舒地尔对兔股静脉移植物内膜增厚
中文摘要
法舒地尔对兔股静脉移植物内膜增厚 作用的实验研究
摘 要
目的:血管损伤是创伤骨科常见问题,约l/3动脉损伤 病例需要血管替代物进行修复。自体静脉移植是治疗中小动 脉缺损的首选方法。静脉移植物受到诸如缺血、机械损伤和 血流动力学变化等多种因素影响,出现一系列适应性变化。 这些变化包括静脉内皮细胞脱落,炎性细胞沉积,中膜平滑 肌细胞增殖并迁移至内膜,细胞外基质在内膜沉积,进而引 起内膜增厚,最终导致血管腔发生狭窄甚至阻塞。据统计, 静脉移植术后5年供体血管狭窄发生率达30%~50%。目前 研究热点主要集中在静脉移植物再狭窄的成因与防治上。法 舒地尔是一种Rho激酶抑制剂,具有降低内皮细胞通透性, 抑制内皮细胞脱落,减缓平滑肌细胞增殖、迁移,减少炎性 因子分泌的作用。本研究采用家兔作为实验对象,建立自体 股静脉.股动脉移植模型,静点法舒地尔干预。取材后对移植 静脉进行组织形态学观察,测定内膜厚度;透射电镜观察细 胞与基质的超微结构变化;增殖性细胞核抗原(PCNA)免 疫组织化学染色观察细胞增殖情况;脱氧核苷酸末端转移酶 介导的脱氧三磷酸尿苷(dUTP)缺口末端标记法(TUNEL) 法测调亡细胞所占比例。通过以上研究来探讨Rho激酶与移 植静脉内膜增厚和管腔狭窄的关系及法舒地尔对移植静脉 狭窄的防治作用及机制。
方法:选取体重2.3.2.5地新西兰白兔24只,随机分为
中文摘要A组(对照组)和B组(法舒地尔处理组),每组l
中文摘要
A组(对照组)和B组(法舒地尔处理组),每组l 2只。每 只动物行两侧股动脉缺损自体静脉移植术。B组动物每日给 予盐酸法舒地尔30mg/kg静点自术前3天直至取材,A组给
予O.9%氯化钠注射液静点做空白对照。术后3天各组动物每
日肌注肝素钠500u/kg抗凝、青霉素80万u预防感染。术后
2、4周取材,每次每组处死6只动物。苏木素.伊红(髓)
染色行组织形态学观察,并测定内膜厚度,电镜观察超微结 构,免疫组织化学方法检测PCNA阳性细胞比例,TUNEL 法检测原位调亡细胞比例,使用计算机图像分析系统进行图 像分析。SPSSl 1.O统计软件处理实验数据,两组比较采用价’ 检验。
结果 1大体观察
动物术中及术后无死亡、伤口感染及移植静脉破裂大出
血,移植静脉的术后即刻及取材时通畅率均为1 00%。 2组织形态 HE染色显示正常静脉内膜主要为单层扁平上皮。术后
AB组内膜均可见增厚,术后2周,A组家兔内膜(Vm)(44.83
±3.53)较B组(30.33±3.23)gq显增厚(PO.05);术后4周,
A组家兔内膜厚度(岬)(66.164-8.45)较B组(43.11±4.92)增
加(PO.05)。
电镜观察A组移植术后2周即可见平滑肌细胞体积增 大,分泌型平滑肌细胞增加;术后4周内膜中可见大量平 滑肌细胞,中膜平滑肌细胞间质及胶原纤维明显增多。B组 术后2周平滑肌细胞未见明显增大;术后4周平滑肌细胞略 有增大,分泌型平滑肌细胞有所增加。
中文摘要3静脉PCNA免疫组化染色
中文摘要
3静脉PCNA免疫组化染色 术后2周,A组内膜PCNA阳性细胞百分比分别为
(20.084-3.56)%,较B组百分数(14.284-2.76)%明显增加;术 后4周两组内膜PCNA的阳性细胞数均减少,A组内膜 PCNA阳性细胞百分比(8.734-1.35)%,较B组(7.6l±1.06m 增多(PO.05)。
4 TUNEL测定细胞原位凋亡 B组移植静脉2周和4周时内膜中阳性细胞所占比例
(3.55±O.36)%和(1.224-0.18%)比A组(1.11±0.31)%和(O.55
±0.11)%明显增多,二者差异具有统计学意义(PO.05)。 结论:法舒地尔抑制细胞增殖、迁移的作用使移植静脉
内膜增厚速度和程度下降,减轻血
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