不同茬口当归根际微生物多样性研究植物学专业论文.docxVIP

甘肃农业大学2008届硕士学位论文捅 甘肃农业大学2008届硕士学位论文 捅 斐 微生物不仅使土壤有机质的分解和合成处于相对平衡状态，而且可矿化有机物提 高土壤肥力。本研究采用PCR-DGGE技术，以生荒地为对照，系统研究了不同茬口 (当归、马铃薯和黄芪)当归苗生长发育及其根际细菌多样性，旨在为筛选可替代生 荒地进行当归育苗的茬口土壤提供依据。研究结果表明： 1．不同茬口育苗当归生长发育表现显著差异，与生荒地相比较，黄芪茬口培育 的当归苗健壮，根系较发达，而马铃薯和当归茬口培育的当归苗较弱，说明黄芪茬口 是可替代生荒地进行当归育苗较适宜的苗床土。 2．不同茬口当归成苗根际土壤肥力存在显著差异，生荒地因养分基础好富余营 养最多。而黄芪茬口由于当归生长健壮，富余营养较少，说明采用黄芪茬口进行当归 育苗时应适当增施有机肥。土壤酸碱性也存在显著差异，其中，马铃薯和当归茬口呈 强碱性(pH8．8)，不利于当归生长发育。然而，生荒地，尤其黄芪茬口碱性较弱， 有利于当归苗生长发育，这为不同茬口当归生长发育的差异性提供了土壤证据。 3．通过研究首次建立了当归根际土壤微生物PCR—DGGE方法体系。通过直接从 各土样提取细菌群落基因组DNA，纯化后以此DNA为模板，采用对细菌的16S rDNA 基因V3区具有特异性的引物对F341GC和R518进行PCR扩增，将长约197bp扩增产 物使用变性剂浓度梯度为30％--一60％的10％的聚丙烯酰胺凝胶分离，最后对电泳谱图进 行分析，得出了细菌多样性的信息。 4．通过采用PCR—DGGE技术对不同茬口和同一茬口不同时期的当归根际土壤非 培养细菌遗传多样性分析。结果表明，细菌种群遗传多样性在不同土样呈现显著差异。 各泳道16S rDNA的V3区条带相似性分析显示，育苗初期当归根际土壤微生物种群差 异较大，但随育苗时间的延长差异性逐渐降低。DGGE对应分析与聚类分析显示，生 荒土和黄芪茬口当归根际微生物群落结构较马铃薯和当归茬口条件下的更为接近。 5．通过细菌类群分析，在不同茬口当归苗根际分离出数目不等且效果较好的电 泳条带，将主要的21个条带测序并提交NCBI GenBank，收录号EU555004EU555024， 经BLAST比对分析表明，来自相同地理环境的四种土样进行当归育苗后，细菌多样性 存在显著差异，当归根际普遍存在大量Ⅱ及Y变形菌纲(Proteobacteria)、拟杆菌 门细菌(Bacteroidetes)，蓝藻门(Cyanobacteria)、绿湾菌门(Chloroflexi)、厚壁 菌门(Proteobaeteda)等优势菌群，而黄芪茬口微生物种群最丰富，除上述菌群外， 还存在酸杆菌门(Actinobacteria)细菌。生荒地条件下当归根际细菌种群随育苗时期 的延后变化最大，其它茬口相对稳定，说明上述菌群可能在当归生长发育过程中起重 要作用。 关键词：群落微生物；当归；PCR_IDGGE；系统发育；典型对应分析。 不同茬口育苗当归根际微生物多样性研究Summary 不同茬口育苗当归根际微生物多样性研究 Summary Soil microbes Call not only sustain the balance of decomposition and composition of soil organic matters，but also improve soil fertility by mineralizing the organic matters． Therefore，keeping the normal constitution and distribution of microbial populations in soil Can assure the stability and development of agricultural ecosystem．In this study， PCR—DGGE technique was used to study the angelica rhizosphere bacterial diversity under different residues．111e results are硒follows： 1．The angelica seedlings showed a significant difference in growth and development under different residues．Compared with the seedlings grown under wild soil，the seedlings under Huangqi residue are vigorous as