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游泳运动对肥胖及肥胖抵抗型NAFLD大鼠干预效果对比探究.docx
游泳运动对肥胖及肥胖抵抗型NAFLD大鼠干预效果对比探究
摘要:探讨肥胖及肥胖抵抗大鼠NAFLD发病机制及运动干 预对不同倾向模型的效果是否存在不同之处,为更好防治 NAFLD提供实验数据。通过高脂饮食诱导建模,从中遴选出 肥胖和肥胖抵抗型两种大鼠,通过肝组织病理切片确定建模 是否成功。而后对大鼠施加5周的游泳运动,运动结束后, 通过测定体脂、脂体比,血脂、肝指数、瘦素水平、空腹血 糖及胰岛素水平等指标,观察运动对不同类型NAFLD的干预 效果。结果发现,肥胖抵抗组体质量与正常组相比差异无显 著性,但肥胖抵抗组与肥胖组同样存在能量代谢紊乱,肥胖 组存在胰岛素抵抗和瘦素抵抗,肥胖抵抗组不显示有胰岛素 抵抗,存在瘦素抵抗。游泳运动改善肥胖组NAFLD的效果较 肥胖抵抗组更为显著。结果表明肥胖组NAFLD与肥胖抵抗组 NAFLD发病机制并不相同,游泳运动对其干预效果也不相同。 游泳运动使能耗增加,减少脂质沉积,能明显改善肥胖组的 瘦素抵抗,恢复脂肪-胰岛素的负反馈调节机制,进而改善 IR,促进NAFLD转归。游泳运动对肥胖抵抗组的改善机制可 能不同于肥胖组,主要是通过调节瘦素的受体结合率,改善 瘦素抵抗,促进NAFLD的转归。
关键词:运动生理学;非酒精性脂肪性肝;肥胖;肥 胖抵抗;游泳运动;大鼠
中图分类号:G804. 2文献标志码:A文章编号: 1006-7116 (2013) 01-0129-06
目前,在基础实验研究中,人们对于非酒精性脂肪性肝 (nonalcoholic fatty liver disease, NAFLD)的研究 多集中对肥胖型对象的防治研究,但越来越多的资料显示, 在非肥胖人群中,NAFLD的发病机率也较高。对NAFLD的防 治而言,脂肪分布情况可能比总体脂肪含量更有意义,本实 验通过对肥胖及肥胖抵抗两种NAFLD模型进行运动干预,旨 在探讨运动对两种NAFLD模型的糖脂代谢、胰岛素抵抗及瘦 素抵抗是否存在不同的机制,为更好防治NAFLD提供实验数 据。
1实验对象与方法
1实验动物与饲料
3月龄SPF级雄性SD大鼠100只,体质量(180±19) g,由广州中医药大学实验动物中心提供,许可证号:SCXK
(粤)2008-0002粵监证字2008D007o常规分笼喂养,自然 光照,饲养环境温度(23±2) °C,自由饮水进食。普通 饲料选用国家标准啮齿类动物混合饲料,由广州中医药大学 实验动物中心提供。高脂饲料采购于广东省医学实验动物中 心。具体成分:按照酪蛋白41.4 g/L、麦芽糖糊精25.6 g/L、纤维素10.0 g/L、胱氨酸0. 5 g/L、黄原胶3 g/L. 果糖3 g/L和其它物质5 g/L加工制备成干粉末。依据玉 米油48. 5 g/L.橄榄油28. 4 g/L、葵花籽油3 g/L制备 混合油。
1.2动物分组
适应性喂养后,随机抽取10只,喂食普通饲料,作为 正常对照组(C);剩余90只喂食高脂高胆固醇饲料,用于 制备肥胖与肥胖抵抗型大鼠NAFLD模型。连续喂养5周后, 根据大鼠体质量将模型大鼠分为肥胖组及肥胖抵抗组,并挑 出肥胖组体质量增加最多的20只,分为肥胖对照(0N)组 10只和肥胖运动(ONE)组10只;肥胖抵抗组体质量增加最 少的20只作为实验对象,分为抵抗肥胖对照组(0R) 10只 和抵抗肥胖运动(ORE)组10只。而后开始进行5周的游泳 训练,每周运动6 d,休息1 d,每天运动1 ho
3取材
运动周期实验结束后,禁食12 h,质量分数10%水合 氯醛麻醉,剖开腹腔后,腹主动脉取血,制血清;分离肾周、 附睾脂肪垫和肝脏称量;部分肝组织以质量分数10%甲醛固 定,制作肝组织病理切片;取部分肝组织,放入液氮保存、 待测。
1. 4检测指标及方法
1)整个实验期间,每周固定时间测量大鼠体质量、体 长1次。计算Lee,s指数。2)采用半自动生化分析仪
(Eppendorf ECOM-F 6124) Eppendorf Co. Germany 检 测血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、总胆固醇(TC)、三酰甘油
(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)以及高密度脂蛋白胆 固醇(HDL-C)含量。(3)血清FFA采用比色法,在722分 光光度计上按照试剂盒说明测试。(4)采用血糖仪测定血浆 葡萄糖;采用双抗体放射免疫分析法测定血清胰岛素,计算 胰岛素抵抗指数(H0MA-IR)二[空腹血糖(FBG) XFINS] /22. 5。(5)采用固相夹心法酶联免疫吸附实验法测定血清 瘦素(leptin)含量(试剂盒由南京凯基生物科技发展有限 公司),所有操作严格按试剂盒说明书进行。(6)肝指数: 称量肝质量与体质量,计算肝型与体重比值,即为肝指数。
(7)通过HE染色制作肝组织病理切片,
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