超微和普通生脉散对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用和机制的比较研究中医内科学专业论文.docxVIP

中文摘要背景 中文摘要 背景 心肌细胞发生缺血再灌注损伤(RI)时，细胞的钙调控发生改变，肌浆网的 钙摄取功能和肌膜钙ATP酶受到抑制，钙离子在细胞内蓄积，形成钙超载；细胞 内过多的钙离子可激活胞内的磷脂酶A2，使细胞膜磷脂分解，由黄嘌呤氧化酶 途径生成大量的氧自由基，后者直接造成心肌细胞损伤，所以细胞内的钙超载和 氧自由基产生增多是造成损伤的重要原因。 心肌缺血再灌注损伤最常见的表现包括心肌酶谱的变化、各种心律失常和心 肌顿抑。西医缺少积极的防治办法，中医治疗能起到一定的疗效。生脉散及其注 射剂是临床广为应用的益气补阴固脱的方剂，其抗心肌缺血再灌注损伤(RI)的 作用备受关注。超微饮片是近年来新研制的一种中药饮片，目前许多研究表明超 微饮片不仅可以替代传统饮片用于临床，而且可以加速药物成分的吸收，减少药 物的剂量。关于超微生脉散在抗心肌缺血再灌注损伤(RI)的作用目前缺少研究。 目 的 1．通过对超微生脉散和普通生脉散抗心肌RI的对比研究，为超微饮片的进 一步研究和开发应用提供理论依据。 2．探索生脉散在抗RI过程中的抗细胞内钙超载作用的调控机制，研究超微 生脉散和普通生脉散对一心flLRl模型细胞内钙离子浓度的影响和对心肌细胞钙调 节蛋白SERCA2、RYR2的mRNA表达的影响。 方 法 1．用结．-}b30min／松开大鼠左冠状动脉前降支的方法造成再灌注损伤模型。 在实验前60min，分别给予生理盐水和药物，分组为：正常组(C)、模型组(M)， 普通生脉散低剂量治疗组(T1)、普通生脉散中剂量治疗组(T2)、普通生脉 散高剂量治疗组(T3)、超微生脉散低剂量治疗组(F1)、超微生脉散中剂量 治疗组(F2)、超微生脉散高剂量治疗组(F3)。实验中观察心律失常的发生 治疗组(F2)、超微生脉散高剂量治疗组(F3)。实验中观察心律失常的发生 情况。再灌；i180分钟后，取血分离血清，检测LDH、CK．MB、MDA、SOD。 摘取心脏，免疫组化测Bax、Bcl．2和caspase．3的表达。 2．培养sD乳鼠心肌细胞，用缺氧／复氧法造成培养心肌细胞损伤模型，复氧 同时分别给予空白血清冻干粉或含药血清冻干粉，细胞分组同前。分组处理后， 正常培养24h，各组检测心肌细胞活力、细胞内钙离子浓度，继而用RT-PCR方法 检测钙调节蛋白SERCA2、RvR2的mRNA表达。 结 果 1．生脉散对大鼠急性心肌缺血再灌注性心律失常的影响：再灌$i180min内， 模型组大鼠再灌注性心律失常的总发生率为83．3％(10／12)，各种心律失常的发 生率较缺血阶段高，并出现了室性颤扑，死亡率25．O％。普通生脉散低荆量组死 亡率11．1％，其它各组无死亡。各生脉散治疗组各种再灌注性心律失常的发生率 均有降低，以超微生脉散中、高剂量组和普通生脉散高剂量组尤为明显，降至 44．4％(4／9)，二者与模型组比较，差异有非常显著性意义(p0．01)。 2．生脉散对缺血再灌注大鼠LDH、CK-MB的影响：模型组心肌酶LDH、 CK．MB均较假手术组升高，分别为1615_+176、665．4_+39．8u／L和742_+153、 289．2_+42．5u／L，两组比较差异有非常显著性意义(p0．01)。各治疗组的LDH、 CK．MB也均高于假手术组，但低于模型组，与模型组比较，差异有非常显著性 意义(p0．01)。同等剂量的超微生脉散和普通生脉散相比，超微生脉散降低缺 血再灌注损伤所致LDH、CK．MB升高的作用更为明显，差异有非常显著性意义 (p0．01)。 3．生脉散对缺血再灌注大鼠MDA、SOD的影响：模型组MDA均较假手术 组升高，分别为6．31_+0．52和0．32_+0．14nmol／ml，各治疗组MDA也较假手术组升 高，它们和假手术组比较，差异均有非常显著性意义(p0．01)。各生脉散治疗 组MDA均低于模型组，与模型组比较差异有非常显著性意义(p0．01)。同等剂量 组MDA均低于模型组，与模型组比较差异有非常显著性意义(p0．01)。同等剂量 的超微生脉散和普通生脉散相比，各超微生脉散组的MDA值均低于同等剂量的普 通生脉散组的MDA值，两者差异有显著}生(p0．05)。 与MDA的变化相反，模型组SOD较假手术组降低，分别为34．5+_15．4和 89．6_+11．5umol／ml，和假手术组比较差异有非常显著性意义(p0．01)。各生脉散治 疗±．RSOD均高于模型组、低刊婿术组，和假手术纽及模型组比较差异均有非常显 著性意义(p0．01 o同等剂量的超微生脉散和普通生脉散相比，超微生脉散升高s0D 的作用更为明显，两者差异有显著性(P0．05)，其中超微生脉散高、中剂量组和普 通生脉散高剂量组的s0D崮咯低于假手术组，但与假手术