糖化血红蛋白测定SOPHA1C临床意义检验科生化项目SOP.docVIP

糖化血红蛋白测定 版本号： 页码：第页共页 1检测原理 总血红蛋白测量：将全血样本加入笫一个含有溶血剂的比色杯屮。溶血剂使红细胞溶解，同时把 释放出的血红蛋白转变为具有特征吸光度光谱的衍生物。从第一个比色杯中转移测定用量的溶解全血 到第二个比色杯屮，以405 nm和700 nm光测量总血红蛋白浓度。 全血+溶血剂 ＞ 释放血红蛋白 ＞血红蛋白衍生物（450nm光测量） 糖化血红蛋白测量：测量了总血红蛋白的第二比色杯中的溶解全血还可用于测量HbAlco第二个 比色杯屮的缓冲试剂里含有抗HbAlc抗体。糖化血红蛋白与抗HbAlc抗体发生反应，形成可溶性抗 原抗体复合物。将一种含有多个HbAlc表位的多聚半抗原试剂加入到第二个比色杯中。多聚半抗原与 剩余（游离）抗HbAlc抗体反应，形成不可溶的抗体-多聚半抗原复合物。在340 nm光下通过比浊法 和在700 nm光下空白对照测量的反应速率，与样本中的HbAlc的浓度成反比。 糖化血红蛋白+抗HbAlc抗体 ?糖化血红蛋白-抗HbAlc抗体抗体复合物 抗HbAlc抗体（剩余）+多聚半抗原 ＞抗体/多聚半抗原复合物（在340 nm有吸收） 2标本采集与处理 1采血方法 采EDTA或肝素抗凝静脉血2?3ml。 2标本保存 标本在2?8 °C可稳定7天。 3注意事项 标本应尽塑避免溶血。 3试剂和设备 1试剂 采用西门子医学诊断产品（上海）有限公司提供的试剂盒。 1. 1试剂组成 试剂船1~2孔为抗体20.5 mg/mL, MESb缓冲液0.025 M, TRI Sc缓冲液0.015 M, pH 6.2稳定剂, 液体;3孔为多聚半抗原试剂M 8ug/mL, MESb缓冲液0. 025 M, TRISc缓冲液0.015 M, pH 6.2稳定 剂，液体；3孔是空的；5?6孔为TTABd （溶血剂）＜1%,液体。 1.2试剂准备 直接使用。 糖化血红蛋白测定 版本号： 页码：第页共页 1.3试剂保存 试剂2-8°C保存，有效期内稳定。 2质控品 美国BIORAD多项免疫类质控液。 3.3校准品 西门子校准品。 4仪器 SIEMENS DIMENSION Xpand Plus/RxL Max 全 口动生化分析系统。 4操作程序 1检测过程流程 签收样品一离心一上机检测一审核报告一签发报告一标本保存。 2样品签收 严格按照标本接收程序签收标本。 3标本处理 以2500?3000i7min,离心6?lOmin,分离血清上机测定。若标本不能及时检测，将分离的血清冷藏 与2-8 °C的冰箱内。 4.4标本检测 4. 1手工编排测试项目：样品按编号装入样品架，主屏幕按FkENTER DATA,在Position处输入样 品所在样品架字母及所在位置号，按enter,在Patient Name处选择性输入病人名字，按enter,在Sample No处输入样品号，按enter,在Tests处使用检验键或检验组合键选择相应项目，根据需要选择相应的 按键改变Mode （按F7:MEXT MODE选择样品管类型）、Priority （按F4:NEXT PRIORITY选择样品的 处理模式）、Fluid （按F8:NEXT FLUID选择标本类型）。 4.4.2双向条形码标本分离血清后直接运行仪器。 4.3运行：输入完毕后按F3:LOAD LIST,确认样品已经装载在样本盘上，按Run键，仪器开始进行 样品检测。 4. 4检验后标本保存 标木检验完成后用采血管原盖盖紧，保存于标本冷藏库内，按H期放好，保存期为7天。 5校准程序 1校准品准备和储存 每瓶加2.0ml蒸憎水复融，轻轻旋转摇匀，室温放置30min,即可使用。 2校准条件 在室内质控失控、更换试剂批号、更换仪器主要配件或进行大保养后均需校准。无特殊情况校准 糖化血红蛋白测定 版本号： 页码：第页共页 周期为3个月。 3校准程序 主屏幕按 F5:PROCESS CTRL-F1: CALIBRATION,按 enter-F2:SET-UPRUN,按项目键选择所需要 校准的项目名称METHOD,选中相应试剂批号LOT,输入操作者姓名Operator、校准液货号Calibrator Product和批号Lot,以及最低值校准液在样品架上的位置Start at Position,最后把校准液各个水 平的值按照由低到高的顺序输到对应位置，按F4： ASSIGN CUPS指定样品杯，校准液按顺序排列在样 品架上，按F7： LOAD/RUN-F4： RUN或“RUN”运行键运行校准程序。 6质量控制程序 1质控品准备和储存 质控品为液体，可以直接使用。原包装质控品-10 ~ -70°C可保存至有效期，未开启2-8°C可保存 90d,开启后2-8°C可保存30d。 2质控