自组装DNA吸附取向的表面增强拉曼光谱法研究-Core.PDFVIP

V o l. 23 高 等 学 校 化 学 学 报 　N o. 12　 2 0 0 2 年 12 月 　　 　　　　　CH EM ICAL JOU RN AL O F CH IN E SE U N IV ER S IT IE S　　　　　　　　　 2303～ 2308　 自组装D NA 吸附取向的表面增强拉曼光谱法研究 董丽琴, 周剑章, 吴玲玲, 董　平, 林仲华 ( 厦门大学固体表面物理化学国家重点实验室, 厦门大学化学系, 物理化学研究所, 厦门 36 1005) 摘要　对金基体上 自组装寡聚核苷酸探针杂交前后进行电化学非现场及现场表面增强拉曼光谱 ( SER S) 研 究. 非现场 SER S 研究表明, 杂交形成的d sDN A 在基体表面以A 型和B 型两种构象同时存在, 杂交过程可 能伴随DN A 链在基体表面吸附取向的变化. 根据现场 SER S 研究结果可知, ssDN A 及 d sDN A 的大多数 SER S 谱带强度随电极电位正移而降低, 尤其是归属于碱基A 的两种面外振动模式, 谱带变化更为明显. 利 用 SER S 表面选择定则判断出随着电极电位由负向正变化, ssDN A 及 d sDN A 螺旋吸附取向由垂直吸附向 平躺吸附于金基体表面变化. 关键词　寡聚核苷酸探针; 杂交; 表面增强拉曼光谱( SER S) ; 吸附取向 中图分类号　 646　　　　文献标识码　 　　　　文章编号　025 10790 (2002) O A 随着人类基因组计划的顺利实施, 基因芯片研究正成为基因组研究的一个热点. DN A 在基体上 的固定化和杂交效率的提高以及杂交信号的检测是基因芯片技术进一步完善的关键. 在已有的几种基 [ 1 ] 因探针的固定方法中, 单分子层膜 自组装技术具有灵敏、响应快和易控制探针密度等优点 . 在影响 基因芯片杂交的因素中, 寡聚核苷酸探针在基体表面的覆盖度及吸附取向直接影响杂交效率的高 低[2, 3 ]. 当前, 基因芯片主要采用的荧光标记检测法虽具有较高的灵敏度, 但所需仪器昂贵且难以实现 [4 ] 自动化 . 我们一直致力于发展一种灵敏度较高的电化学标记法, 而寡聚核苷酸探针及杂交双螺旋在 基体表面的吸附取向影响到其与电化学活性的标记物的相互作用, 进而影响到标记物的灵敏度. 因 此, 从分子水平上研究DN A 在金属溶液界面的吸附取向具有重要意义. SER S 技术灵敏度高, 可提供样品分子吸附部位和吸附取向的信息. 同时由于具有很好的界面选 [ 5 ] 择性而使其对于现场电化学体系研究具有重要的价值 .