介孔分子筛的形貌控制及其在酶固定和蛋白分离方面的应用-无机化学专业论文.docxVIP

复旦丈学磷士学位论文 复旦丈学磷士学位论文 中文摘《 摘 要 在经历了十几年的发展历程之后，人们目前已经能在微观(原子或分子)、 介观和宏观尺度上分别对介孔材料实现一定程度的控制，目前介孔材料的发展方 向主要包括新型材料的探索合成、已有材料的改性和修饰、以及进一步丌发介孔 材料的工业应用。本论文开展了三部分的工作。 (1)球形介孔材料的合成： (2)介孔材料在蛋白分离方面的应用： (3)介孔材料在固定化酶方面的应用。 在第二章中，我们采用P65为结构导向剂，正硅酸乙酯为硅源，在酸性介质 中采用静置法成功地合成出了尺寸均一的介孔氧化硅球。通过改变合成温度、反 应时间、无机盐KCl的加入量，可以在9．0～17、6 gm之间调控介孔氧化硅球的直 径；通过改变合成温度、加入TMB的量或者改变水热温度可以在2．3～4．8 nrn之 问调节介孔氧化硅球的孔径。考察了TEOS用量对结果的影响，发现只有当 TEOS／P65三1：o．03(摩尔LL)时，所得产物才为表面光滑的球形颗粒。当介孔氧化 硅球的形貌尺寸一致时，随着孔径增加，对溶菌酶的吸附量和吸附速率都逐渐增 加；所得介孔氧化硅球只对直径小于其孔径的蛋臼才有明显的吸附，表明孔径均 匀可调的介孔氧化硅球材料可以很好地用作体积排阻色谱的固定相。除此之外， 我们还尝试了采用P85为结构导向剂来合成介孔氧化硅材料。 在第三章中，我们以SBA一15介孔分子筛作为分离纯化粉尘螨主要变应原 Der厂2的层析基质，在其表面交联上离子交换基团DEAE，使其既具有分子筛作 用，又具离子交换作用的特点，实验结果显示层析后从混合的变应原蛋白溶液中 获得单一洗脱峰，并经SDS．PAGE．得一条谱带，其相对分子质量为14000，表明 经分离纯化所得的蛋白质是粉尘螨主要变应原Derf2。对螨性哮喘患者皮肤点刺 试验表明所得Der厂2仍具有变应原活性。文献所用分离纯化Derf2的方法步骤 多，耗时长，容易引起变应原失活，而本文仅通过一次柱色谱即得纯Der厂2。我 们的结果表明：DEAE．SBA一15是一种较好的离子交换层析剂；介孔分子筛SBA一 15也可以用作其它离子交换剂的基质材料。 在第四章中，我们考察了具有笼状结构介孔材料的窗口大小、SBA．15系列 材料的形貌、温度、蛋白溶液初始浓度、平衡浓度和介孔材料表面羟基量对吸附 的影响。结果表明，对于FDU一12，吸附速率主要受窗口大小的控制，而与笼大 复旦大学硕士学位论文 复旦大学硕士学位论文 中文摘要 小无关；对于孔径、孔容等因素基本～致的SBA一15系列介孔材料，仅仅因为宏 观形貌不同(小棒状，麦穗状、介孔一大孔复合膜、块体)，其对溶菌酶最大吸附 量可以相差约50倍，吸附速率差异亦较大；对于棒状和传统的SBA一15，吸附速 率均随温度升高而增大，对于棒状的SBA一15，最大吸附量与温度无关，而对于 传统SBA．15，最大吸附量随温度升高而增加；实验结果表明吸附速率和最大吸 附量与溶菌酶的初始浓度无关；溶菌酶在棒状SBA一15上的吸附属于Langmuir单 层吸附，理论最大吸附量为490 mg／g，脱附常数肠为’0．007 mg／mL，说明溶菌酶 和介孔分子筛之间有较强的作用力；对于捧状SBA一15，材料表面的羟基量只对 吸附速率有影响，而对最大吸附量没有影响。 关键词：介孔材料，形貌控制，蛋白分离，固定化酶 墨呈奎兰鎏圭兰堡篁奎 墨呈奎兰鎏圭兰堡篁奎 薹兰堡圣 Abstract The discovery of ordered mesoporous materials has opened a new in the field of material science．During the past decades，progress has been made in the controllable synthesis of mesoporous materials with novel chemical compositions，various mesestructure and adjustable morphologies．Current res