基于大鼠闪光刺激视皮层诱发电位的研究-神经生物学专业论文.docxVIP

IIll IIll 1 1 il lll I li l fl l l III ＼1 93 1 868 原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究 所取得的成果。除文中己经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或 集体己经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体， 均己在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。 学位做懈彩堤 同枞／，年够月矽矗 学位论文使用授权声明 本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品，知识产权归属郑州大学。 根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部 门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅：本人授权郑州大 学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索，可以采用影印、 缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学 位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时，第一署名单位仍然为郑 州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。 学位论文作者：享多谚 日够9，侔归 F 飞 中文摘要基于大鼠闪光刺激视皮层诱发电位的研究 中文摘要 基于大鼠闪光刺激视皮层诱发电位的研究 研究生张春燕 导师章茜 郑州大学基础医学院 河南郑州450052 中文摘要 研究背景和目的： 视皮层是视觉的最高级中枢，视觉信息经由视觉通路最终传导到视皮层， 再经皮层的分析与综合产生视觉。初级视觉皮层(primary visual cortex Vl 区)是视觉信号进行初级处理的区域，能够反映出不同视觉刺激模式下视觉信 号的的基本特征。 视觉诱发电位(visual evoked potential，VEP)，是大脑皮层对视觉刺激 发生反应的一簇电信号。视觉诱发电位按刺激的方式大致可分为图型刺激和闪 光刺激视觉诱发电位(flash visual evoked potential，FVEP)。闪光刺激为弥 散的非图形刺激，明暗反差强烈，不需专注注视，包括各种色光的刺激。目fji『 已知，不同色光刺激对大鼠视皮层的影响不同。大鼠对红光刺激不敏感，而其 他单色光能使大鼠视皮层场电位发生变化。也有研究表明在大鼠视皮层V1区存 在对颜色敏感的神经细胞，通过功能性的磁共振技术证实这些细胞具有对不同 颜色刺激的分辨能力。 中枢乙酰胆碱为兴奋性神经递质，与许多生理和病理生理相关，胆碱能M 型受体阻断剂东莨菪碱可显著降低乙酰胆碱能活性，胆碱能M型受体激动剂卡 巴胆碱可显著提高乙酰胆碱活性[3-4]。本实验采用红、绿2种单色光和白光， 探讨不同色光刺激对大鼠初级视皮层视觉诱发电位的影响；通过给予胆碱能受 体阻断剂和受体激动剂，并结合免疫组织化学，进一步探讨初级视皮层胆碱能 神经元在视觉诱发电位诱导中的功能和意义，为视觉脑认知的研究提供一定的 实验资料。 中文摘要方法： 中文摘要 方法： 1实验动物及分组：健康成年SD大鼠30只，体重2209一--2809，雌雄不限。 实验分为三组：对照组，卡巴胆碱组，东莨菪碱组。 2电生理记录： 大鼠10％水和氯醛麻醉后，于颅骨前囟向后7．0mm，左侧旁开 2．0mm(初级视皮层V1区)和前囟前2．0mm，左侧旁开2．0mm处钻孔，分别 植入长4mm，直径1．2mm的不锈钢螺钉作为记录电极和参考电极。术后第5天 开始实验。实验前，让大鼠在暗箱中适应30 min，继之，分别记录给予红、绿、 白光刺激视皮层V1区的诱发电位。记录时间为下午，每次记录约2h。首先， 将LED调为白光，调整刺激参数。然后，将LED调为红光或绿光，同样方法描 记皮层诱发电位。为避免大鼠视觉疲劳，组问实验间隔10 min。对闪光刺激条 件下的视皮层Vl区诱发电位主波的波幅(uV)及潜伏期(ms)作定量分析。 3．免疫组化：将电生理记录后的对照组和阻断剂(东莨菪碱)组大鼠麻醉，4％ 多聚甲醛心脏灌注，取出脑组织，石蜡包埋、切片。含有VI区的脑组织切片经 脱蜡，抗原修复及血清封闭，分别与抗ChAT抗体(1：100)或抗C．Fos抗体 (1：100)，4。C孵育过夜。继之，与兔抗山羊IgG(1：250)孵育。阴性对照采 用二抗同时进行。 4．统计处理所有数据以均值±标准差表示，SPSS 10．0统计软件包进行两两比 较LSD检验或t检验，以P0．05表示具有统计学意义。 结果： l闪光刺激诱导VI区产生诱发电位 给予白光和绿光刺激可诱发大鼠视皮层Vl区产生诱发电位，红光刺激不 能引起明确的诱发电位。白光和绿光刺激引起V1区诱发电位的潜伏期和幅值 无显著变化。 2胆碱能受体激动剂及阻断剂对VI区诱发电位的影响 给予胆碱能受体受体激动剂．卡巴胆碱，白光和绿光刺激可增强Vl区诱发 电位的幅值；给予胆碱能受体阻断剂．东