摇摇摇色谱鄄质谱联用法在体液小分子检测中的应用-物理化学学报.PDF

第27卷 第1期 摇 摇 大 学 化 学 Vol.27 No.1 摇 2012年2月 UNIVERSITY CHEMISTRY Feb.2012 摇 摇 摇 摇 色谱鄄质谱联用法在体液小分子检测中的应用 王少敏摇 张凯摇 杨贯羽* (郑州大学化学与分子工程学院摇 河南郑州450052) 摇 摇 摘要摇 体液小分子的种类和含量反映了机体的代谢信息。 色谱鄄质谱联用技术在体液小分子检测中显示 出巨大的发展潜力。 本文简要介绍近年来不同类型的色谱鄄质谱联用法在体液小分子检测中的应用,并对未 来的发展给予了展望。 摇 摇 关键词摇 色谱鄄质谱联用法摇 体液摇 小分子摇 应用 摇 摇 近年来,随着联用技术的不断革新,色谱鄄质谱联用技术在体液小分子分析中发挥了越来越重要的 作用。 色谱的优势在于分离,可将复杂混合物中的各组分分离,但定性和确定物质结构的能力较差;质 谱能够提供物质的结构信息,但样品需要纯化后才能进样分析。 接口技术将这两种分析方法结合起来, 协同作用,取长补短,使色谱鄄质谱联用法在生物样品分离分析中备受青睐,已广泛应用于体液小分子的 [1] 检测 。 摇 摇 体液即身体内的液体,主要包括尿液、血液、唾液、羊水、人奶、精液、脑脊髓、肺腔的液体等。 体液中 除了水还含有丰富的化合物。 体液小分子通常是指相对分子质量小于1000 的物质,主要有核苷、氨基 酸、糖类和其他一些代表性化合物。 这些物质在体液中的种类和含量反映了机体的代谢状况,而利用色 谱鄄质谱联用技术检测体液小分子所得到的一系列样品信息,对研究人类机体代谢有着积极的指导意 义。 色谱鄄质谱联用技术主要包括气相色谱鄄质谱联用、液相色谱鄄质谱联用和毛细管电泳鄄质谱联用。 这 些联用技术凭借各自的优势为分离分析体液小分子提供了广阔的平台。 1摇 气相色谱鄄质谱联用法(GC鄄MS) 摇 摇 GC鄄MS是分析仪器中最早实现联用技术的仪器。 GC主要是利用物质的沸点、极性及吸附性质的 差异来实现混合物的分离。 样品进入气化室气化后,被载气带入色谱柱,载气的流动使样品组分在运动 中进行反复多次的分配,最终载气中分配浓度大的组分先流出,固定相中分配浓度大的组分后流出。 经 气相色谱柱分离后的样品呈气态,并且流动相也是气体,与质谱的进样要求相匹配,可直接引入质谱,而 质谱又具有高灵敏度、高鉴别力的特点,因此 GC鄄MS是分析复杂混合物最为有效的手段之一。 对于极 性强、挥发性低的物质,需要衍生化后再进行GC鄄MS分析,在改善分析对象的挥发性同时还能提高检测 [2] 灵敏度。 例如梅慧芬等 在利用GC鄄MS技术对半乳糖血症患儿尿液成分的分析中检测到至少34 种代 谢物。 摇 摇 体液的种类繁多,但目前用于实验研究的主要是尿液和血液,这是由于这两种类型的体液来源广 泛,采样方便并且可以连续性取样。 而尿液以其非侵入性无损取样的优势,应用最为广泛。 因此,我们 的综述内容也主要集中于色谱鄄质谱技术在尿液和血液中的小分子检测。 1.1摇 GC鄄MS法检测尿液中小分子 摇 摇 人的尿液中包含上万种化合物,这些化合物代表了人体的代谢状况。 准确分离分析尿液中的小分 * 通讯联系人 52 大 学 化 学 第27卷摇 [3] 子化合物,能为各种疾病的诊疗提供可能的依据。 例如,Nasrallah F等 利用GC鄄MS法分析了肌酸缺 乏症(CDS)患者尿液中胍基乙酸和肌酸的含量,并将实验结果与HPLC鄄MSMS法比较,最终认定该法对 于诊断CDS是一种快速、可靠、可行的方法。 [4] 摇 摇 肝癌是一种常见的恶性肿瘤,Wu H等 处理了20位男性肝癌患者和20位男性正常人的尿样,经 衍生化后通过GC鄄MS检测,发现了103种代谢产物,其中66种是已经标记过的已知物质,18种代谢产 物在肝癌患者和正常人中有显著性差异———这种以尿样代谢物作为生物