间接免疫组化和间接免疫荧光检测石蜡切片中鹅细小病毒方法的建立及其在雏鹅体内病毒分布规律的研究-预防兽医学专业论文.docxVIP

摘 摘 要 利用纯化的鹅细小病毒(GPV)免疫家兔制备的兔抗GPV抗体．建立了能特异性检 测百蜡组织切片中GPV的问接免疫组织化学([IS)和1’珂j接免疫荧光方法(IIF)。[IS 年I]IIF枪测健康鹅组织呈阴性。检测鹅源血清l型鸭疫单默氏杆茼、大肠杆菌(OlOs)、 沙门氏菌、多杀性巴氏卡r菌、雏鹅新型病毒性肠炎病毒感染发病和死亡雏鹅的肝脏组 织呈阴性：检iNGPV感染死亡的推鹅的心、肝、脾、肺、肾、大脑、十二指肠、盲肠、 空肠、回肠、直肠、胸腺、胰腺、法氏囊组织呈阳性或强阳性。 运用建立的IIS方法．对人工感染GPV后病毒在锥鹅体内的分布舰律进行了研 究，结果表明：病毒在雏鹅体内的分布觇律因病毒感染的途径的不同而存在差异。从 病毒的时矧分布情况看：GPV经皮下注射感染后8h能从肝脏、肾脏中检出病毒抗原； 感染后12h，能够从雏鹅的心脏、肝脏、脾脏、肾脏、十二指肠和脚晾中检出病毒抗 原；感染后24h，能从雏鹅的心脏、肝脏等10种组织中枪出病毒抗原；感染后48～96h 汉不能从肌肉、食道和腺胃中检测出抗原；感染后192h，肺脏和胰晾中已检测不出 GPV抗原，其他组织的阳性程度降低；在感染后576h仪能从l／2只肝脏和’卜=指肠 中舱出病毒抗原。一GPV经口服感染后8h能从肝细胞中检出病毒抗原；感染后12h， 能从雏鹅的心脏、肝脏、瞥脏、十二指肠和法氏囊中_{鱼出病毒抗原：感染后24h，能 从谁鹅的心脏等8种组织中检出病毒抗原：感染后48h能从肺脏等12种组织中检出 病毒抗原；感染后96h～144h仅不能从肌肉、食道和腺胃中检测出抗原；在感染后57613 仅能从肝脏和肾脏中捡出病毒抗原。GPV滴鼻感染后8h能从肝细胞中检出病毒抗原； 感染后I!h，能从雏鹅的心脏、腓脏、脾脏、肾脏、十二指肠和法氏囊中俭出病毒抗 原；感染后24h，能从雏鹅的肝脏等8种组织中硷出瘸毒抗原：感染后48h能从胰腺 等12种组织中轮出病毒抗原；感染后96—144h仅不能从肌肉、食道和腺胃中检测出 抗原；在感染后576h仍能从1／2只肝脏和回肠中硷出病毒抗啄。 从感染后病毒窿各个组织的分布情况看：经皮下感染后从各组织巾的捡出墒毒情 况为：肝脏(17／22)7圩脏(14／22)十二指珏厅(13／22)心脏(12／22)、夺肠(12／22)、 脾肌(1 2／22)L-i肠【11／22)大脑(10／22)盱对豫(9／22)商肠f 8／22)，[肠(6／22)、 浊氏囊6／22)肿脏t 5／22)、胰腺(5／22)。经门暇感染再痫毒从荠组织中的险m情 况为：肿脏(1 8／22)肾脏(12／22)、-f‘．指肠(12／22)、心脏t 1 2／22)2-空肠(11／22) 肼’脏f{0／22)、M肠【10／22)胸腺(9／22)大戳《7．?二二)肖肠(6,Q2j，肺脏f 6／22) 直肠(5／22)、法氏囊(5／22)、胰腺(5，+22)。经滴势感染后痫毒从子}Ij织【卜的检H 5 情况为：肝脏L17／22)肾脏(14／22){’二指物(1l,22)、心脏(1l／22)、≈!肠【11／22)、 脚脏(11／22)心肠(10／22)、胸腺(10／22)大触(7；22)、法氏傻(7／22)}了肠(6／22j、 肺脏(6／22)、胰腺(6／22)直肠(4／22)。 运用建立的IIF方法对人工感染GPV后喇毒征雏鹪体内的分钸觇律进，于研究表 明：GPV的分彳Ij规律与IIS办法的检测规律总体一i：寝脱一致，仅任个体一l：彳r所等片。 GPV经皮下注射、口眼和滴鼻感染雏鹅后4h、50d均不能从体内检出病毒抗原。 GPV经皮下注射、口眼和滴鼻感染雏鹅后4h、50d均不能从体内检出病毒抗原。 GPV经不同途径感染后．皮下注射感染后96h病毒在机体内各组织的分布最为广泛， 口眼、滴鼻组感染后144 h病毒在机体内各组织的分布最为广泛，但在检测的组织中 目『且『}：的检出率最高，均未能从肌肉、腺胃、食道中检出病毒抗啜。 关键词：鹅细小病毒(GPV)间接免疫组织化学(IIS)』’日J接免疫荧光(IIF) 病毒分布规律 Detection Detection of goose parvovirus using indirect immunohistoehemistry and indireet immunofluorescenee from experimentally infeeted in paraffin—embedded tissue and distribting regularity of goose parvovirus in infected goslings ZHOU Chun—yu(Preventive Veterinac,’medicine) Direc