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究,/该部分实验应雨细脆培养和ICC技术,成功魂获得了纯度和蔟量都较
究,
/该部分实验应雨细脆培养和ICC技术,成功魂获得了纯度和蔟量都较 高§争角膜上皮缩胞,并在角膜缘源住缬脆中发现了梭形缅脆群,经相关签 定籍推灞厝者W能耩予角膜予缩脆正在增獾转纯静TAC或TMC缁耱。实
验结果还发现,正常情况下,角膜缘深毪缩藏翡生长速度和奎活状态都优
予中夹角膜深馁缅施。
在成功构建动裙焦貘碱筑伤模鍪鹣基继上,秘瘸HE、LM、SEM鞍 TEM授本扶形态上蕊察角膜不同部像不潮时辐在溅烧伤条佟下瓣交亿藏 异,发现戮下结果:蓄先,角膜修复避程串静纲藏培养及形态学变纯在谶 烧伤嚣24h左右相辩最大;其次,碱烧伤螽角貘鑫备修复过程帮碱性物蒺黪 损伤俸焉弼辩进行;第三,碱烧伤条伴下,中央焦簇损镑豹修复速度和效 果均爵于角簇缘损伤。
另外,细德墙莽及形态学研 示,角貘肉皮罄在城烧饶嚣懿组织 修笈过程串也发挥了重要侔焉。
二、PA/PA I级联在角簇碱烧伤后修复淫控{乍用豹初步矫究
舷部分实验仍采雳绥缒培养霸ICC技术,在动物角膜碱烧伤模型掏建 豹罄秣上磷究PA/PAl级联串戆凡个主要成员tPA、uPA、uPA.R霹PAI.2 在不圈部锭不潮爵耀韵表达馕况,戳探讨它们在刽伤j蠡台过纛中豹调控掇 律,结果发现:蕉膜躐烧髫§螽PA/PAI级联各主要觳予参与缨鼹移缝级修复 的调控援德与其在皮默到伤愈会中熬髂用基本一致,{嚣角膜碱烧伤蜃24h 左右是PA/PAI缓联大郏分因予摆对活跃静黠麓。
焦褥淀意豹是,PAI。2戆表达对捆臻迟于其余3秘因子,目黠uPA翻 uPA-R在角膜碱烧痿慝修复过程中还存在一个次裹表达除段,这可能与 P_献-2裳达豹黪低_摹囊碱性物质的持续损害馋用鸯关。y
三、襄l貘溅烧伤蜃应激调控基因的赫选翻轫步鉴是
/该部分实验是在懿殛瓤分实验缝粜豹基破上,选择热膜缘在减烧伤裁 移碱烧伤簸24h嬲个时相,从离然细胞是度磷究溅烧伤兹最怒膜缘参与修 复调控基因的差异表达,以求戆选到与角膜于缨胞相关的应激基因共进行
初步鉴定。所采用的实验方法是SSH、细胞培养、RT.PCR、分子克隆以
初步鉴定。所采用的实验方法是SSH、细胞培养、RT.PCR、分子克隆以 及生物信息学等相关技术。
实验结果发现兔角膜缘碱烧伤后差异表达的应激调控基因片段5条, 其中上调基因片段3条,下调基因片段2条,己通过初步鉴定,并进行了 GeneBank登录。其中新l号样品可能是TSP家族中TSP2系列的新成员, 推测和碱烧伤条件下角膜干细胞的原始应激产物有关。
实验结果还提示,TsP2在碱烧伤后组织修复过程中的作用应该得到重 视和进一步研究。 y
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关键词: 角膜 角膜缘 角膜干细胞 碱烧伤 修复 细胞培
养及形态学PA/PAI级联 SSH 差异表达
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A pnmary study on the cornea repair after alkali burn Abstract
Cornea is a disc—like avascular film in the most anterior of the eyeball.It composes five layers in histology from outside to inside,and the most outside layer is epithelial layer.Cornea is a component ofthe ocular dipotric system,it is the main reflecting interface of the eye,its high diaphaneity is the basis for
good visual acuity and inhibiting light from scattering.
With the rapid development ofthe industry and agriculture in recent years, the chemical burn of cornea especially alkali burn becomes more and more serious.The most effective clinical therapy method to chemical bum is cornea transplantation,but its repair rate is the lowest in all corneal lesion transplantation.Also,the corneal donors are so rare as compared t
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