姜黄素诱导的K562细胞死亡中自噬的作用及其与凋亡的关系-药理学专业论文.docxVIP

自噬在Curcumin诱导的K562细胞死亡中的作用机制及其与凋亡的相互关系 自噬在Curcumin诱导的K562细胞死亡中的作用机制及其与凋亡的相互关系 中文摘要 姜黄素诱导K562细胞死亡中自噬的作用及其与凋亡的 关系 中文摘要 目的：研究自噬在Curcumin诱导的K562细胞死亡中的作用机制及其与凋亡的 相互关系。 方法：用不同浓度的姜黄素处理人慢性粒细胞血病细胞株K562细胞，采用MTT 法测定姜黄素对K562细胞增殖的抑制作用；应用MDC荧光染色、Hochest和AOEB 染色观察给药后自噬和凋亡的发生；检测LDH漏出率以观察用自噬特异性抑制剂3 一MA后姜黄素抑瘤作用的变化；免疫组化、流式细胞仪观察自噬在姜黄素诱导的 K562细胞死亡中的分子机制及自噬与凋亡的关系。 结果：姜黄素可显著抑制K562生长，诱导自噬及凋亡发生；且此作用呈明显 的时间、剂量依赖性；MDC荧光染色显示姜黄素给药后3h可诱导K562细胞发生 自噬；Hochest和AOEB染色荧光染色显示姜黄素给药后48、72h可诱导K562细 胞发生显著的凋亡和坏死。LDH漏出率实验结果表明，在姜黄素给药前阻断自噬， 姜黄素对K562细胞的细胞毒性作用增强，而在其给药后阻断自噬则姜黄素对K562 细胞的细胞毒性作用有所减弱；姜黄素诱导K562细胞发生自噬时，自噬特异性蛋 白LC3被激活；姜黄素诱导的K562细胞死亡与细胞线粒体膜电位的下降有关。 结论：姜黄素能明显抑制K562细胞的生长，并诱导其发生自噬和凋亡。在姜 黄素给药前期，自噬对细胞有保护作用，可作为一种防御机制抵御环境变化对细胞 造成的损伤，隔离某些凋亡因子，延迟凋亡的发生；而在姜黄素给药后期，自噬则 作为一种细胞的死亡程序，促进凋亡的发生，凋亡是姜黄素诱导K562细胞死亡的 主要原因。线粒体介导了死亡信号通路中自噬与凋亡的相互作用。 关键词：姜黄素；凋亡；自噬；K562；3-MA：线粒体 作 者：潘红宁 指导老师：梁中琴秦正红教授 自噬在Curcumin诱导的K562细胞死亡中的信用机制及其与凋亡的相互关系 自噬在Curcumin诱导的K562细胞死亡中的信用机制及其与凋亡的相互关系 英文掇疆 Effects of Autophagy and Cross—·talk Between Autophagy and Apoptosis on Curcumin--induced Death of K562 Cells Abstract AIM To study the effects of autophagy and cross—talk between autophagy and apoptosis in Curcumin—induced death of K562 cells METHODS After treatment谢m Curcumin，the growth inhibition of K562 cells was assessed by MTT colorimetfic assay． MDC staining was used tO examine autophagy induced by Curcumin in K562 cells．Hoechest and AOEB staining were used tO examine apoptosis induced姆Curcumin in K562 cells．To examine the involvement of autophagy in Curcumin-induced death of K562 cells，the autophagy specific inhibitor 3-methyadenine O—MA)was added诚m Curcumin and the cytotoxicity of Cureumin was measured by lactose dehydrogenase(LDH)leakage． Immtmohistochemistry,flow cytometry and analysis were used to study the apoptotic and autophagic mechanisms involved in death of K562 cells． RESULTS The proliferation of K562 cells Was significantly inhibited in a dose·and time—dependent manner after Cureumin treatm