姜黄素诱导人食管癌Ec-9706细胞凋亡及其机制的研究-病理学与病理生理学专业论文.docxVIP

姜黄素诱导人食管癌Ec-9706细胞凋亡及其机制的研究-病理学与病理生理学专业论文.docx

  1. 1、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。。
  2. 2、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载
  3. 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
  4. 4、该文档为VIP文档,如果想要下载,成为VIP会员后,下载免费。
  5. 5、成为VIP后,下载本文档将扣除1次下载权益。下载后,不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们
  6. 6、成为VIP后,您将拥有八大权益,权益包括:VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
  7. 7、VIP文档为合作方或网友上传,每下载1次, 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等,对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
河北医科大学 河北医科大学 学位论文使用授权及知识产权归属承诺 本学位论文在导师(或指导小组)的指导下,由本人独立完成。 本学位论文研究所获的研究成果,其知识产权归河北医科大学所有。 河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学 位论文主要内容相关的论文,第一署名单位为河北医科大学,试验材 料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则, 承担相应的法律责任。 研究生签名:赵蠹会导师 院领导签名: 月2富日 河北医科大学 研究生学位论文独创性声明 本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果,除了 文中特别加以标注和致谢等内容外,文中不包含其他人已经发表或撰 写的研究成果,指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写, 文责自负。 研究生签名:赵耄冷导师签名 堙日 中文摘要姜黄素诱导人食管癌Ec.9706细胞凋亡 中文摘要 姜黄素诱导人食管癌Ec.9706细胞凋亡 及其机制的研究 摘 要 目的:食管癌是常见的消化道恶性肿瘤之一,我国是食 管癌的高发国家,每年因食管癌死亡的人数占全部恶性肿瘤 死亡的近四分之一。目前治疗食管癌除早期手术,化学药物 已成为治疗恶性肿瘤的重要方法,但是绝大多数化学药物的 细胞毒作用缺乏特异性,在杀死肿瘤细胞的同时,无选择的 杀伤正常细胞。因此,寻找毒副作用小,抗瘤活性强的化疗 药物已成为国内外研究的热点。姜黄素是从姜黄属植物姜黄 的根茎中提取的一种植物多酚,可用于食品上色及佐味。近 年研究发现其药理作用广泛,如抗炎、抗氧化、抗凝、降血 脂、抗动脉硬化及抗肿瘤等作用。尤其姜黄素可诱导多种肿 瘤细胞凋亡,作为一种具有良好发展前景的抗癌药物,日益 引起人们的关注,但对人食管癌的作用及分子机制研究较 少,本研究通过体外培养人食管癌Ec.9706细胞,研究姜黄 素作用后细胞形态、细胞凋亡及其调控基因表达的影响,探 讨姜黄素在食管癌细胞中的作用机制,为食管癌的化学防治 提供实验依据。 肿瘤发生不仅是瘤细胞的过度增生,还存在死亡过少, 凋亡机制障碍,细胞凋亡参与肿瘤起始过程,并对肿瘤发生 发展起负调控作用。本研究运用多种实验技术,对细胞凋亡 中凋亡抑制蛋白因子(Livin),促凋亡因子(Smac)矛1]Caspase.3 中文摘要进行检测和分析,以期进一步阐明细胞凋亡调控基因在肿瘤 中文摘要 进行检测和分析,以期进一步阐明细胞凋亡调控基因在肿瘤 发生发展中的作用。 方法:将Ec.9706细胞于37℃,饱和湿度5%C02的常 规条件下培养,待细胞进入对数生长期后用于实验。 l应用光镜观察细胞形态学变化:将不同浓度的姜黄素 作用于Ec.9706细胞,在倒置相差显微镜下定时观察细胞的 生长情况并照相。 2采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测药物对细胞的生长 抑制作用。 3流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡、细胞周期分布:收集 经不同浓度姜黄素作用12h、24h、48h的Ec.9706细胞及对 照组细胞,冷PBS漂洗。预冷70%乙醇4C,固定,上机检 测前离心去固定液,O.5%胃蛋白酶消化,碘化丙锭(Propidium Iodide,PI:50mg/L Trinton X-100 1.O%)室温避光染色。流式 细胞仪上机检测,应用软件进行分析。 4 FCM检测caspase.3蛋白的表达:收集经不同浓度姜黄 素作用12h、24h、48h的Ec.9706细胞及对照组细胞,按常 规方法进行荧光标记,流式细胞仪检测荧光强度,以荧光指 数(FI)表示蛋白的表达情况。 5应用免疫细胞化学方法观察细胞凋亡调控因子Srnac、 Caspase3蛋白表达的变化。 6 western blot半定量检测基因蛋白Livin、Smac、Caspase3 表达,并分析各蛋白表达之间的相关性及其在姜黄素抗食管 癌中的作用机制。 结果: 中文摘要姜黄素对Ec.9706细胞凋亡及其调控基因的影响 中文摘要 姜黄素对Ec.9706细胞凋亡及其调控基因的影响 1经40、80、120、160}tmol/ml姜黄素处理Ec.9706细 胞12h、24h和48h后,倒置相差显微镜下观察,与对照组相 比,用药组的细胞生长明显被抑制,胞浆内颗粒增多增粗, 核浆比例降低,部分细胞变圆而悬浮在培养基内。提示 Ec.9706细胞趋于凋亡。 2分别用姜黄素(O、40、80、120、160Iamol/m1)作用于 Ec.9706细胞12、24、48h,MTT结果显示姜黄素能明显抑 制Ec.9706细胞的增殖,并呈剂量和时间依赖性。作用12h、 24h和48h后,Ec.9706细胞半数抑制率(inhibitory concentration giving 5 0%inhibition, IC50)分别为 2 16.1447p

您可能关注的文档

文档评论(0)

131****9843 + 关注
实名认证
文档贡献者

该用户很懒,什么也没介绍

1亿VIP精品文档

相关文档