胶质瘤microRNA差异表达的研究-生物医学工程专业论文.docxVIP

原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究 原创性声明 本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究 工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢 的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不 包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我 共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。 作者签名：翟丕至坚 日期： 盟钮月≠日 学位论文版权使用授权书 本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校 有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文， 允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内 容，可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科 学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》， 并通过网络向社会公众提供信息服务。 名：型新签雄嗍坐心月尹日 硕士学位论文 硕士学位论文 中文摘要 胶质瘤microRNA差异表达的研究 摘要 研究背景：脑胶质瘤(glioma)是中枢神经系统最常见的肿瘤， 且其发病率随年龄增大有增高的趋势。脑胶质瘤通常呈浸润性生长， 具有很强的侵袭能力，手术难以根治性全切及术后肿瘤复发，是导致 死亡的主要原因之一。因此，研究其发生发展的机制，有助于更进一 步了解其肿瘤的生物学行为，从而寻找更完善的治疗策略。寻找新的 潜在的药物干预靶点，有着重要意义。miRNA是新近发现的一类小 RNA分子，其在生命活动中发挥了重要调控作用。异常的miRNAs 表达与肿瘤的发生发展都密切相关。如何发现更多的miRNA及其靶 基因的研究在这几年是继小干扰RNA之后新的研究热点之一。 研究目的：研究脑胶质瘤组织中miRNA差异表达水平，探讨在 胶质瘤发生发展起重要作用的miRNA和靶基因。迸一步明确脑胶质 瘤发生发展的机制和寻找潜在的脑胶质瘤药物治疗靶点。 研究方法：收集脑胶质瘤新鲜组织标本6例，非肿瘤脑组织6例， 提取总RNA和miRNA，采用丹麦Exiqon公司microRNA8．0分析芯 片进行检测，筛选差异表达的miRNA，采用荧光定量RT-PCR验证 差异表达的miRNA，采用生物信息学软件分析差异表达的miRNA调 控的靶基因，进而采用RT-PCR和Western．blot方法验证靶基因mRNA 和蛋白的表达水平，探讨在胶质瘤发生发展起重要作用的miRNA和 靶基因。 结果：本次实验miRNA芯片采用双通道系统，芯片组内重复实 硕士学位论文 硕士学位论文 中文摘要 验1次，芯片间技术重复实验共3次。应用非等级聚类分析的方法将 胶质瘤和非肿瘤脑组织放在一起聚类分析，与非肿瘤脑组织相比，共 有146个miRNAs在胶质瘤组织细胞中有显著差异，包括11个上调 和39个下调表达差异较为显著的miRNAs。在I～II级胶质瘤月}肿 瘤脑组织芯片差异性表达的miRNAs中，5个显著性上调的miRNAs： miR-122a、miR-296、miR-18b、miR．486、miR-150； 17个下调的 miRNAs：miR-1 06b，miR-503，miR-5 1 6·5p，miR一237、miR一1 5a、 miR-21、miR-17b、miR-361、miR-67b、miR-107、miR．489、miR-330、 miR．3 8 1、miR-96、miR-409．5p miR-1 95、miR-200c。在Ill-IV级 胶质瘤组织／非肿瘤脑组织芯片差异性表达的miRNAs中，6个显著性 上调的miRNAs·miR-486、miR-26a、miR-324—3p、miR-46c、 miR．1 8b、 miR．30d；22个显著性下调的miRNAs：miR-130b、 miR-23 5，miR-2 1，miR-43 3，miR-299—5p，miR一99b miR-5 20a， miR一542—3p、miR一195、miR一487b、miR-487a、miR·1 70、miR-96、 miR-324—5p，miR-206，miR-4c，miR-193b、miRNAs，miR-237， miR-208、miR-15b。比较I～II级胶质瘤／非肿瘤脑组织和III～Ⅳ级 胶质瘤组织月乍肿瘤脑组织两组芯片，具有相同显著性差异表达的 miRNAs5个(Rati02_10)：其中上调的有miR．18b、miR．486