酒石酸艾芬地尔抗抑郁作用评价及其在大鼠体内药代动力学研究-药物分析专业论文.docxVIP

PAGE PAGE 10 酒石酸艾芬地尔抗抑郁作用评价及其在大鼠体内药代动力学研究 摘 要 目的：（1）建立抑郁模型（小鼠绝望实验模型和小鼠获得性无助实验 模型）考察酒石酸艾芬地尔的抗抑郁作用;（2）建立液相色谱-串联质谱 (LC-MS)法测定大鼠血浆中酒石酸艾芬地尔的浓度;（3）研究大鼠体内酒石 酸艾芬地尔的药代动力学特征，建立酒石酸艾芬地尔在大鼠体内的药-时曲 线，为重复给药提供依据。 方法：（1）建立小鼠绝望实验模型和小鼠获得性无助实验模型，分为 阴性对照组（生理盐水）、实验组（酒石酸艾芬地尔）、阳性实验组（氯胺 酮），并分别以累计不动时间和逃避次数为指标，评价酒石酸艾芬地尔的快 速起效抗抑郁作用。（2）建立 LC-MS 法测定大鼠血浆中酒石酸艾芬地尔 的浓度。优化色谱条件（色谱柱的选择、流动相的比例、进样量）和 MS 条件（优化 Fragmentor 电压、最佳检测离子等的选择）；考察空白基质是 否对待测药物测定存在干扰，并进一步考察 LC-MS 方法的线性范围、稳 定性、精密度、准确度、提取回收率、基质效应等；（3）选取健康雄性 SD 大鼠（250-300 g），给药后在 15 个时间点（10、20、30、40、50、60 、 75、90、100、110、120、150、180、240、360 min）取血浆测定血药浓度， 每个时间点 5 只，按 LC-MS 方法测定大鼠血浆中酒石酸艾芬地尔的浓度。 （4）以采血时间为横轴（ X ）,以平均血药质量浓度为纵轴（ Y ），绘制 酒石酸艾芬地尔药-时曲线，所得数据应用药代动力学专业软件 DAS 2.0 （ Drugand Statisties softwaro 2.0 ）进行运算得到其药代动力学参数和房 室模型。 结果：（1）小鼠强迫游泳实验（ FST ）显示，在给药 0.5 h、2.0 h 和 4.0 h 后，阳性对照组（氯胺酮）、低剂量组、中剂量组和高剂量组均显著 缩短小鼠累计不动时间，且均与阴性对照组存在显著性差异（ P 0.05 )， 而低剂量、中剂量、高剂量组三者之间缩短小鼠累计不动时间差异并不明 显（P 0.05)；在给药 6.0 h 后，阳性对照组显著缩短小鼠累计不动时间， 且与阴性对照组存在显著性差异（P 0.05)，但药物组缩短小鼠累计不动 时间与阴性对照组不存在显著性差异（P 0.05)。（2）小鼠获得性无助实 验模型结果显示：在给药 0.5 h、2.0 h 和 4.0 h 后，阳性对照组（氯胺酮）、 高剂量组和低剂量均显著减少小鼠对电击的逃避失败次数，与阴性对照组 存在显著性差异（ P 0.05），且低剂量和高剂量组之间减少逃避失败次数 差异并不明显( P 0.05)。两种抑郁模型的实验结果提示：酒石酸艾芬地尔 能快速逆转小鼠抑郁模型的行为，其可能具有与氯胺酮相似的快速起效抗 抑郁作用。（3）建立了专属性好、准确度高、灵敏快捷的 LC-MS 法测定 大鼠血浆中 酒石酸艾芬地尔 的浓度 ，其 色谱条件为采用 C18 分 析 柱 （ Agilent，5 μm，4.6 × 15 mm）；预柱（Agilent，4 mm × 2.0），柱温 30 ℃； 流动相为甲醇-乙酸铵溶液( pH 7.20)，流速: 0.6 mL /min；进样量: 10 μL， 检测波长 274 nm。MS 方法为：采用电喷雾离子源单杆四级杆串联质谱， 在正离子模式下进行检测。空白血浆中的内源性物质不干扰待测组分和内 标的测定；基质对酒石酸艾芬地尔也无明显的离子抑制或增强现象，且在 5.00 ~ 120.00 μg/L 浓度范围内，线性良好（r2 = 0.9957,n = 6）；（4）采用药 代动力学专业软件 DAS（Drugand Statisties softwaro 2.0）进行数据处理、 拟合得到的酒石酸艾芬地尔在大鼠体内代谢的药-时曲线，酒石酸艾芬地尔 经腹腔注射后在大鼠体内的药动学模型为单室模型，其达峰浓度为 113.79 μg/L，半衰期为 2.42 h。 结论：（1）对抑郁动物模型行为学影响的试验证明，艾芬地尔在给药 后能迅速产生抗抑郁疗效，效果在 4 h 内持续稳定，但药效不与剂量成正 相关性;（2）建立了测定大鼠血浆中酒石酸艾芬地尔的浓度 LC-MC 方法， 该方法准确、快捷。（3）酒石酸艾芬地尔经腹腔注射后在大鼠体内的药动 学模型为单室模型，其达峰浓度为 113.79 μg/L，半衰期为 2.42 h。 关键词：酒石酸艾芬地尔；抑郁模型；LC-MS；药代动力学 Studies on the antidepressant effect and pharmacokinetics in rats of ifenprodil tartrate A