萝卜肉质根形成性状的蛋白组分析与种质资源鉴定.pdfVIP

萝卜肉质根形成性状的蛋白组分析与种质资源鉴定 3讨论……………………………………………………………………………………………………………………………．：!() 第三章双向电泳三种染色方法比较分析……………………………………………………………．．23 1材料与方法………………………………………………………………………………………．24 1．1材料………………………………………………………………………………………24 1．2总蛋白质的提取…………………………………………………………………………24 1．3蛋白质溶解与定量………………………………………………………………………．．24 1．4双向电泳分析……………………………………………………………………………24 1．4．1等电聚焦(IEF)…………………………………………………………………24 1．4．2胶条的平衡………………………………………………………………………．24 1．4．3十二烷基磺酸钠一聚丙烯酰胺电泳分析(SDS．PAGE)………………………．25 1．5染色…………………………………………………………………………………………………………………．．：15 1．5．1银染…………………………………………………………………………………………………………25 1．5．3胶体考马斯亮蓝染色(CBB．G250)……………………………………………25 1．6双向电泳图谱采集与分析………………………………………………………………．25 2结果与分析………………………………………………………………………………………25 2．1经典考马斯亮监染色与胶体考马斯亮蓝染色分析……………………………………25 2．2经典考马斯亮蓝染色与银染分析………………………………………………………26 3讨论……………………………………………………………………………………………………………………………．：17 第四章萝卜肉质根不同发育时期的双向电泳分析…………………………………………………29 1材料与方法………………………………………………………………………………………30 1．1材料……………………………………………………………………………………………………………………30 1．2萝卜肉质根总蛋白质的提取……………………………………………………………30 1．3蛋白质的溶解与定量……………………………………………………………………30 1．4第一向等电聚焦(IEF)………………………………………………………………．30 1．5第二向SDS．PAGE电泳…………………………………………………………………3l 1．6考马斯亮蓝染色…………………………………………………………………………31 1．7图像采集与分析…………………………………………………………………………3l 1．8蛋白质点胶内酶解与质谱分析…………………………………………………………3l i．9数据库检索与分析…………………………………………………………………………3I 2结果与分析……………………………………………………………………………………．．3l 2．1NAU—XXxS肉质根不同发育时期双向电泳图谱分析…………………………………3l 2．2NAU．LLYH肉质根不同发育时期舣向电泳图谱分析…………………………………34 2．3 2．4质谱鉴定的蛋白质点分析………………………………………………………………38 3讨论……………………………………………………………………………………………………………………………．zl() 第五章利J}{j种子蛋白sDS．PAGE技术进行抗热萝卜种质鉴定……………………………………41 1材料和方法……………………………………………………………………………………一42 1．1材料…………………………………………………………………………………………………………………～42 1．2方法……………………………………………………………………