乙型肝炎病毒前S1抗原的研究进展.doc

PAGE PAGE 1 乙型肝炎病毒前S1抗原的研究进展 　　1965年Blumberg发现了“澳大利亚抗原”，随后确定为乙型肝炎病毒（HBV）标志物；1970年英国的Dane等人在电镜下鉴定了Dane颗粒，即乙型肝炎病毒颗粒，并阐明了颗粒的表面成分乙型肝炎表面抗原（HBsAg）、核壳成分乙型肝炎c抗原（HBcAg）和乙型肝炎e抗原（HBeAg）。从此检测HBV感染的方法学迅速建立，进而促进了流行病学调查的广泛开展。近年来，随着对HBV前S1（pre-S1）抗原在乙型肝炎发病机制、HBV感染与复制等方面研究的深入，发现它对诊断具有越来越重要的临床意义[1]。 　　一、Pre-S1抗原与HBV嗜肝细胞性 　　HBV基因组有4个开放读码框，分别为S、C、P和X区，其中编码病毒外壳蛋白的S区，分为pre-S1、pre-S2以及S区，分别编码包膜上的pre-S1、pre-S2和HBsAg。Pre-S1抗原是由108或119个氨基酸组成，其长度因亚型而异，adw亚型的pre-S1抗原比ayw亚型约长11个氨基酸。Pre-S1抗原位于病毒颗粒的表面，具有高度的免疫原性，介导宿主的免疫应答。它是肝细胞特异的无涎糖蛋白受体，有高度活跃的细胞内吞饮功能，HBV可能以pre-S1区氨基酸21～47片段作为结合部位结合肝细胞。该片段相当保守，变异的病毒只要这一片段完好就有传染性。 　　二、Pre-S1抗原的反式转录激活功能 　　Kim等在HepG2细胞、中国仓鼠卵巢细胞中，证实pre-S1抗原具有反式转录激活功能，缺失突变分析显示pre-S1氨基酸残基21～56片段对于转录活性是必需的，此段序列含有6个精氨酸残基，具备酸性反式激活因子常见的特征[2,3]。在HBV感染者体内的毛玻璃样肝细胞中，pre-S1抗原与转化生长因子α（TGFα）存在共表达现象，而TGFα和HBsAg共转基因鼠的原发性肝癌发生机率明显大于单一转基因鼠。进一步研究发现，pre-S1抗原能够反式转录激活TGFα启动子基因，增加TGFα的表达水平，这在HBV感染后原发性肝癌的发生中起着重要作用[4]。 　　三、Pre-S1抗原与机体免疫状态 　　HBV感染后病程依赖于宿主对病毒的免疫反应，其中包括对pre-S1抗原，pre-S2抗原与HBsAg免疫应答。Pre-S1抗原有很强的免疫原性，在T细胞反应水平上显著高于HBsAg。 　　Sulowska等[5]使用流式细胞仪检测异硫氰酸荧光素（fluores-ceinisothiocyanate,FITC）标记的pre-S1抗原（FITC/pre-S1）与外周血淋巴细胞的结合力，发现它与淋巴细胞的亲和力主要依赖于淋巴细胞的激活状态：用pre-S1抗原刺激恢复期淋巴细胞导致FITC/pre-S1结合细胞数的百分比明显高于未受到刺激的细胞和静息的细胞。他们就急性乙型肝炎患者、慢性乙型肝炎患者、HBsAg携带者及健康志愿者外周血单核细胞（PBMC）对合成的pre-S1（20～49）X4抗原的增殖反应进行了研究，发现急性乙型肝炎恢复期患者PBMC对pre-S1（20～49）X4抗原有明显的增殖反应，而慢性乙型肝炎、HBsAg携带者PBMC对pre-S1（20～49）X4抗原的增殖反应均低于前者。以上研究表明，如果机体缺乏有效的针对pre-S1抗原的免疫反应，就不能清除HBV，就会发展为慢性肝炎或HBV携带者[6]。Yuki等[7]研究也显示机体对pre-S1抗原的免疫耐受在HBV的持续感染中起着非常重要的作用。 　　四、Pre-S1抗原的临床应用 　　1.Pre-S1抗原在反映HBV感染与复制中的价值：（1）Pre-S1抗原与慢性乙型病毒性肝炎病毒复制间的关系：Chemin等[8]通过聚合酶链反应检测了73例慢性乙型肝炎患者HBVDNA，同时采用特异性单克隆抗体检测了pre-S1抗原，其中25例有症状的慢性乙型肝炎患者HBVDNA均阳性，除1例患者抗-HBe阳性外，其余24例患者pre-S1抗原均阳性。在无症状HBsAg携带者中，HBVDNA的阳性率为73%，pre-S1抗原的阳性率为50%。20名健康志愿者HBV标志物均阴性，氨基转移酶正常，HBVDNA与pre-S1抗原均为阴性。连续检测1例急性乙型肝炎患者与1例慢性乙型肝炎患者的HBVDNA和pre-S1抗原，发现两个标志物的变化是平行的。法国Zoulim等[9]曾进行一项前瞻性研究，通过特异性单克隆抗体放射免疫法检测了116例患者437份血清中的pre-S1抗原和pre-S2抗原。Pre-S1抗原/HBsAg的比例在病毒复制活跃的慢性乙型肝炎患者组显著升高，其中前C区变异的患者，其pre-s1抗原/HBsAg比例明显高于无症状HBV携带者。而pre-S2抗原/HBsAg比例与