ABO正反定型不符的问题分析及解决办法.doc

PAGE PAGE 1 ABO正反定型不符的问题分析及解决办法 一、ABO正反定型不符的问题分析 （一）ABO定型问题经常发生的情况为： 1.　明显缺失应该出现的抗-A或抗-B： (1)新生儿血样 (2)免疫缺陷、免疫紊乱 (3)前带现象 (4)血型型物质过多 (5)抗原太弱，常规方法检查不出来，相应血清中无抗体 (6)亚型，反应是混合视野 2.　由于试剂被污染，或试剂中有额外抗体 3.　明显多出抗原(或多出抗体) (1)亚型，如A2型可能血清中有抗-A1 (2)自家凝集 (3)获得性B （二）引起ABO正反定型不一致的原因分析 1.　技术因素： (1)试剂贮存不当 (2)使用技术错误 (3)使用错误的试剂 (4)使用污染或失效的试剂 (5)离心速度不当 2.　存在IgM性质的自家冷抗体 由于自家冷抗体(冷凝集病,CHD)而导致自家溶血的病人，在低于37℃时血细胞自发凝集，影响正反定型。可用DTT或2-ME来处理细胞及血清来解除此种IgM抗体引起的干扰。血清的反定型可在37℃进行，用O型红细胞作为对照。 3.　抗原表达弱或缺失： (1)A、B抗原的表达可在下述情况下被抑制： a.白血病 b.双胞胎 c.H基因变异 (2)A、B抗原表达太弱：由于A、B抗原表达太弱，与抗-A或抗-B不反应，但确实存在A或B抗原，因此血清中无相应的抗体。 4.　高水平可溶性血型物质的病人： 极少数有卵巢囊肿的妇女，由于含高浓度的可溶性血型物质，使抗原减弱或消失，此血型物质分泌进入血液可以中和抗-A或抗-B。当使用未洗涤的RBC用于ABO定型时，型物质就会中和抗-A或抗-B，引起假阴性反应。 5.　混合视野： (1)来自近期输注非ABO同型红细胞病人的血样 (2)骨髓移植后不久 (3)Tn或A3型红细胞 6.　缺失或弱抗-A、抗-B (1)新生儿血清 (2)免疫缺陷、紊乱病人 (3)老年人 7.　前带现象 当抗-A或抗-B的效价（如35000）IgG太高时,立即离心法与A或B细胞不反应。解决方法： (1)EDTA抗凝血浆结合钙 (2)使用EDTA保存液悬浮细胞 (3)将血浆于56℃灭活补体 (4)血浆或血清用盐水1:10稀释 8.　多凝集：多凝集红细胞，具有不正常的膜结构，可被正常成人血清凝集。起因是微生物酶引起膜的改变，以及膜上糖基合成不完善。 9.　不正常血清蛋白： 白蛋白/球蛋白比例失调的血清引起红细胞产生缗钱状假凝集。 10.血样血清中存在抗试剂成分的抗体：如抗防腐剂的抗体、抗EDTA的抗体等，此种抗体可以通过将红细胞洗涤而解除。 二、解决ABO定型不一致的指导原则 （一）出现弱反应或缺失抗原的解决方案 出现弱/缺失抗原的可能情况 1.　A亚型、B亚型或AB亚型 2.　疾病状态：如白血病导致A或B抗原减弱，何杰金病（Hodgkinrsquo;s）有时会抑制抗原表达，与白血病类似。 3.　过量的血型物质：由于某种疾病（如腹腔癌、胰腺癌、卵巢囊肿）导致血浆中存在大量的型物质，中和抗－A或抗－B抗体，引起正定型为假阴性或弱阳性。通过洗涤红细胞可解决此问题。 4.　获得性B 5.　抗－A或抗－B试剂中存在低频抗原的抗体 出现弱/缺失抗原的解决措施 1.　洗涤RBC且延长孵育时间进行试验，如果使用洗涤红细胞后反应加强，则考虑是型物质的抑制 2.　酶处理红细胞再次试验 3.　吸收放散确定是否是亚型。 4.　了解输血史(尤其是O型红细胞输注)来分析混合视野 5.　了解病情诊断（尤其是白血病） 6.　了解是否是骨髓移植受者 7.　了解是否是双胞胎 8.　是否使用从前未使用过的单克隆抗体血清进行了血型鉴定 9.　分泌型型物质检查 10.进行玫瑰花试验来确定是否混入其它红细胞，或进行细胞分离 11.如果是弱A或弱B遗传，则检查红细胞上H抗原的表达 　　　　　　 患者的正定型与正常反应强度相比属于减弱的反应。从反定型中可以看出，患者血清中不存在ABO系统以外的抗体干扰，也不存在自身抗体的干扰，因和B细胞产生反应，表明红细胞上可能具有A抗原。在正定型中与国产的单克隆抗-A无反应活性，而和抗-AB有弱反应，暗示A亚型的可能。 通过吸收放散、型物质检查确认A亚型。可能是A3。 （二）出现弱反应或缺失抗体的解决措施 出现弱反应或缺失抗体由四种情况引起 1.　年龄：新生儿及老人。 2.　低球蛋白血症：如白血病人、使用免疫抑止药物、低球蛋白的淋巴瘤病人（恶性）、骨髓移植后病人。 3.　丙球缺乏血症：如免疫缺陷病人 4.　双胞胎嵌合体 解决方案 1.　延长反应时间 2.　于室温及4℃检查血清中的抗体。用A、B、O及自身红细胞进行检查 3.　于室温及4℃检查血清中抗体。用酶处理的A、B、O及自身细胞进行检查。可能需要在试验前进行冷抗体的自身吸收 4.　确定病人年龄及