慢性乙型肝炎患者外周血骨桥蛋白水平及其临床意义.docxVIP

慢性乙型肝炎患者外周血骨桥蛋白水平及 其临床意义 【摘要】目的检测慢性乙肝患者的外周血骨桥蛋白 (OPN)水平，研究OPN与慢性乙肝的关系其临床意义。方 法采用酶联免疫吸附试验方法检测8例健康对照者和47例 慢性乙型肝炎患者的外周血骨桥蛋白水平，观察其在各组中 的表达水平并探讨其在慢性乙肝疾病发展中的意义。结果 所有慢性肝炎组外周血OPN水平均高于正常组，OPN水平随 肝脏炎症程度加重而增高，与反映肝脏炎症的生化指标呈正 相关，与乙肝病毒的复制无关。结论测定骨桥蛋白水平变 化可评估乙肝患者肝功能状况及疾病的严重程度，对判断乙 肝患者预后有一定价值。 【关键词】骨桥蛋白；慢性乙肝；酶联免疫吸附试验 慢性乙肝是我国常见的慢性传染病之一，同时也是一个 全球性的公共卫生问题，全世界共约3. 5亿人感染乙肝病毒, 且每年不断有新发感染者，而感染HBV后一旦慢性化后，病 情迁延不愈，经过若干年后最终发展至肝硬化甚至肝癌，严 重危害全人类的健康。然而，慢性乙型肝炎的致病环节仍未 完全阐明，但病毒持续复制和机体免疫清除反应是发病的主 要因素。 骨桥蛋白(Osteopontin OPN)是一种带负电的非胶原 性骨基质糖蛋白，由多种组织细胞合成与分泌，广泛的分布 于多种组织和细胞中，功能上具有细胞因子的特点，在多种 疾病的发生、发展中起着重要作用。研究发现骨桥蛋白是免 疫细胞募集及启动Thl细胞免疫的关键细胞因子，参与许多 炎症反应的病理过程，与多个系统疾病发病有关。本实验通 过检测不同程度肝功损害的人外周血骨桥蛋白水平，探讨其 在慢性乙肝中的临床意义。 1资料与方法 1临床资料55例患者取自广东医学院附属医院2009 年4月-2010年1月间住院患者，其中单纯慢性乙型肝炎且 无肝硬化者35例（轻度16例，中度9例，重度10例），男 性32例，女性3例，年龄范围在17-70 （平均年龄 43. 66±15. 10）岁间，慢性重型乙型肝炎12例，男性10例, 女性2例，年龄范围在24-63 （平均年龄47. 83±14. 27）岁 间，正常对照组8例，男性5例，女性3例，年龄范围在24-57 （平均年龄36. 63±10. 50）岁间。慢性乙肝的诊断符合2005 年中华医学会肝病分会、感染病分会修订的《慢性乙型肝炎 防治指南》的诊断标准，6个月内未接受过抗病毒治疗，排 除血清学检测证实其他肝炎病毒感染或重叠感染者，排除非 病毒感染如嗜酒、使用肝毒性药物等引起的慢性肝炎或隐源 性肝炎。 1.2实验方法 2. 1血样用清洁试管收集血液，抽血30分钟后离心, 1000Xgl5分钟，收集血清，分装后-2(TC冷冻保存。 1.2.2检测外周血OPN采用酶联免疫吸附实验法 (ELISA)技术检测。OPN试剂购自武汉博士德生物工程有限 公司，使用美国宝特BIO-TEK ELX800型酶标仪检测，各项 操作均严格按照说明进行。 1.2.3检测各项生化指标 采用常规方法检测血清转氨 酶、胆红素、白蛋白、A/G比值、胆碱酯酶、凝血酶原时间 等，PCR法检测HBV-DNA载量。 1.3统计学分析计量资料均采用平均数土标准差表 示，样本均数间用t检验或方差分析，相关性分析用Pearson 相关，检验水准a =0.05,实验结果采用SPSS13. 0统计软件 进行分析。 2结果 1各组血清骨桥蛋白水平比较各组肝炎均高于正常 组，与正常组比较存在显著差异。组与组间的两两比较均有 统计学差异，见表1。 2.2将肝炎患者按轻度、中度、重度、重型分组，分别 与正常组的骨桥蛋白进行水平，除轻度组与正常组无统计学 差异外，其余组均高于正常组且存在统计学意义。组与组比 较均存在统计学差异，见表2。 2.3肝炎患者外周血骨桥蛋白水平与肝功能各个指标 之间的关系骨桥蛋白与谷丙转氨酶没有相关性，与谷草转 氨酶、总胆红素、凝血酶原时间呈正相关，与胆碱酯酶、白 蛋白、A/G比值呈负相关，见表3。 2.4慢性乙肝外周血OPN水平与乙型肝炎病毒 (HBV-DNA). HBeAg 之间的关系 结果提示 HBV-DNA、HBeAg 复制变化分组之间不存在统计学差异，见表4。HBV-DNA复 制水平分组之间也不存在统计学差异，见表5。 3讨论 目前认为HBV感染人体后出现的一系列改变与人体的免 疫状态有关，主要是由细胞介导的免疫损伤引起的。乙型肝 炎病毒感染及慢性化过程中有多种免疫细胞通过直接杀伤 和分泌细胞因子抑制病毒，间接导致肝细胞的损害，产生炎 症反应。目前Thl/Th2细胞因子分泌失调和树突状细胞(DC) 数量及功能低下是乙肝慢性化机制中报道比较多的。HBV感 染后ThO细胞可在不同的信号刺激下分化成为Thl或Th2细 胞。Thl细胞是促炎性T细胞，HBV感染后分泌细胞因子能 增强NK细胞、巨噬细