2019年高三生物大一轮总复习：第37讲微生物的培养与应用.doc

eq \o(\s\up17(第37讲),\s\do5())eq \o(\s\up17(微生物的培养与应用),\s\do5()) 考点一　微生物的实验室培养 1．培养基 (1)概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。 (2)种类：液体培养基和固体培养基，二者的区别是是否添加凝固剂。 (3)营养成分： ①确定原则：根据微生物的需要。 ②主要营养物质：碳源、氮源、水和无机盐。 ③其他条件：pH、特殊营养和氧气。 2．无菌技术 (1)目的：获得纯净的培养物。 (2)关键：防止外来杂菌的入侵。 (3)常用方法：灭菌和消毒。 (4)无菌技术的主要方法及适用对象(连一连) 3．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 4．纯化大肠杆菌 (1)原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个菌落就是纯化的细菌菌落。 (2)主要方法及纯化原理： 5.菌种的保藏方法 (1)临时保藏法：对于频繁使用的菌种，先接种到试管的固体斜面培养基上培养，然后放入4℃ (2)甘油管藏法：对于需要长期保存的菌种，先将菌液转入灭菌后的甘油中，混匀后放在－20℃ (选修1 P18“旁栏小资料”)微生物的接种方法只有平板划线法和稀释涂布平板法吗？微生物接种的核心是什么？ 提示：不是，微生物的接种技术还包括斜面接种、穿刺接种等方法，其核心是防止杂菌污染，保证培养物的纯度。 【误区警示】 微生物培养的“三个提醒” (1)培养基中营养物质的确定方法 ①自养型微生物所需的主要营养物质是无机物，碳源可来自大气中的CO2，氮源可由含氮无机盐提供。 ②异养型微生物所需的营养物质主要是有机物，即碳源必须由含碳有机物提供，氮源也主要由有机物提供，部分异养型微生物也可以利用无机氮源。 (2)选择无菌技术的原则 ①考虑无菌技术的效果：灭菌的效果比消毒要好。 ②考虑操作对象的承受能力：活体生物材料、操作者的手等只能采用消毒，而不能灭菌。 (3)纯化大肠杆菌的两种方法的异同。 ①相同点：平板划线法和稀释涂布平板法都能获得单细胞菌落。 ②不同点：平板划线法不能对微生物计数，而稀释涂布平板法能对微生物计数。 1．(2017·新课标全国卷Ⅰ)某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用。回答下列问题： (1)有些细菌能分解尿素，有些细菌则不能，原因是前者能产生________。能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO2作为碳源，原因是____________________________________________________。但可用葡萄糖作为碳源，进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是__________________________________________________(答出两点即可)。 (2)为了筛选可分解尿素的细菌，在配制培养基时，应选择________(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素＋NH4NO3”)作为氮源，不选择其他两组的原因是 (3)用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用有____________________________________(答出两点即可)。 【解析】　(1)能分解尿素的细菌体内应含有脲酶；能分解尿素的细菌是异养型生物，不能利用CO2来合成有机物，可用葡萄糖等有机物作为碳源。进入细菌体内的葡萄糖既能为细胞生命活动提供能量，又可为其他有机物的合成提供原料。(2)筛选可分解尿素的细菌，应选择以尿素为唯一氮源的培养基，而能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用NH4NO3，其他两组不能起到筛选作用。(3)用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和Na2HPO4，这两种物质既可为细菌生长提供无机营养，又可作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH相对稳定。 【答案】　(1)脲酶　分解尿素的细菌是异养生物，不能利用CO2来合成有机物　为细胞生命活动提供能量，为其他有机物的合成提供原料 (2)尿素　其他两组都含有NH4NO3，能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用NH4NO3，不能起到筛选作用 (3)为细菌生长提供无机营养，作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH稳定 2．(2016·新课标全国卷Ⅰ)空气中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物，以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。实验步骤如下： ①配制培养基(成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O)； ②制作无菌平板； ③设置空白对照组和若干实验组，进行相关操作； ④将各组平板置于37℃ 回答下列问题： (1)该培养基中微生物所需的氮来源于____________。若要完成步骤②，该培养基中的成分X通常是________。 (2)步骤③中，实验组的操作是__________