基于无机纳米材料构建电流型甲胎蛋白免疫传感器的研究-分析化学专业论文.docxVIP

3．1．5检测定方法 3．1．5检测定方法 。16 3．2结果与讨论 ．16 3．2．1免疫传感器在组装过程中的循环伏安表征 ．．16 3．3实验条件的优化 18 3．3．1缓冲溶液液pH的优化 1 8 3．3．2孵育时间和孵育温度的优化 ～1 8 3．4免疫传感器的性能 19 3．4．1免疫传感器对AFP抗原的响应性能 一19 3．4．2免疫传感器的选择性和稳定性 20 3．4．3免疫传感器的初步应用 2 l 3．5结论 ．．2l 第四章基于碳纳米管／L-半胱氨酸／Fe304@Au纳米复合材料电流型甲胎蛋白免 疫传感器的研究 22 4．1实验部分 22 4．1．1仪器与试剂 22 4．1．2 DMF-MWNTs纳米复合物的制备 23 4．1．3 Fe304@Au复合纳米粒子的制备 23 4．1．4免疫传感器的制备 一23 4．1．5检测方法 24 4．2结果与讨论 ～24 4．2．1不同纳米材料的透射电镜(TEM)分析 ～24 4．2．2疫传感器的电化学特性 25 4．3实验条件的优化 ～27 4．3．1缓冲溶液pH的优化 27 4．3．2孵育时间及孵育温度的优化 27 4．4传感器的性能 ．．28 4．4．1免疫传感器的对AFP抗原的响应性能 ．．28 4．4．2免疫传感器的选择性和稳定性 28 4．5结论 ．29 参考文献 30 作者硕士期间发表的学术论文 34 墅i[ 谢 ．35 两南大学硕十学伊论文 两南大学硕十学伊论文 摘要 基于无机纳米材料构建电流型甲胎蛋白免疫 传感器的研究 分析化学专业硕士学位申请人朱宇萍 指导教师 袁若教授 摘 要 甲胎蛋白(a．fetoprotein，AFP)是肝癌细胞表达的高特异性蛋白质，很多肝癌病人 (70～80％)在发病期间都有AFP基因高表达的特征。传统的医学理论认为AFP基因的高表 达是肝癌发生过程中的一个伴随现象，是肝癌发生的特异性肿瘤标志物。新的研究结果表明 细胞外的AFP能与其受体结合，介导生长信息的传递；细胞内的AFP不仅能抑制凋亡信号的转 导，而且也能促进生长信号的传递，这是AFP具有抗凋亡和促进增殖功能的新发现，该研究结 果赋予AFP新功能的认识和寻找到治疗肝癌的新靶点。因此，开发新型的AFP检测方法具有重 要的理论意义和现实的应用价值。 电化学免疫传感器是将电分析技术与特异性免疫反应相结合，用于监测抗原一抗体反应的 生物传感器。电流型免疫传感器是电化学传感器中技术最为成熟的一种。与其他电化学免疫 传感技术相比这一方法无需分离、洗涤，可实现简便、快速免疫分析。本文利用无机纳米材 料表面官能团密度大、吸附能力强、达到吸附平衡的时间短等诸多优点，结合金纳米粒子制 备纳米复合材料并用于构建电流型甲胎蛋白免疫传感器。该免疫分析方法较传统测定AFP的方 法，更简便、更快速。 本论文主要研究以下几个方面： 1．基于纳米金与牛血清白蛋白．二氧化钛复合物固定甲胎蛋白免疫传感器的研究 二氧化钛纳米粒子与常规材料相比具诸多优点，如：无毒，优良的电学性能，良好的热 稳定性，不强的吸湿性，以及良好的成膜性等。本文将二氧化钛纳米粒子溶于氨基化溶剂牛 血清白蛋白中制得牛血清白蛋8---氧化钛纳米复合物。实验结果表明，利用该纳米复合物修 饰金电极能够人量吸附生物亲和性好、比表面积大的纳米金颗粒，并通过纳米金成功固定甲 胎蛋白抗体。利用此法研制的甲胎蛋白电流型免疫传感器对甲胎蛋白抗原有很好的电流响应， 在最优实验条件下，其检测范同为0．01～80．0 ng／mL，检出限为0．003 ng／mL，实现了对甲胎蛋 白抗原的定量分析。该免疫传感器制作简单、成本节约、环保、灵敏性高。 2．纳米金和磁性纳米复合物构建无试剂电流型免疫传感器的研究 I 两南人学硕十学伊论文 两南人学硕十学伊论文 摘要 四氧化二铁纳米粒子是一种典型的磁性纳米材料，具有易分离、易富集、易提取的优点， 常用于制备生物感器。本文首先制备了具有易丁磁性分离、硫革(Thionine，Thi)包覆的四氧 化三铁(Fe304)纳米复合物。通过静电吸附和共价键合作用，将Nation、硫苇包覆的Fe304 复合纳米粒子层层修饰剑玻碳电极表面，最后利用纳米金吸附甲胎蛋白抗体(anti．AFP)，从而 制得了灵敏度高、稳定性好的无试剂电流犁甲胎蛋白免疫传感器。实验通过透射电子显微镜 (TEM)对该复合纳米粒子进行了表征，并用循环伏安法考察了电极的电化学特性。实验结果 表明，Fe304／硫堇复合纳米粒子修饰的电极在实验过程中