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江苏农业学报(JiangsuJ.of Agr.Sci.),2018,34(1):11~19
http:/ / www.jsnyxb.com 11
卓城洁,袁 萌,伍文攀,等. 家福捕鸟蛛毒腺 cDNA文库构建及其毒素-16序列和活性分析[J].江苏农业学报,2018,34
(1):11-19.
doi:10.3969/ j.issn.1000-4440.2018.01.002
家福捕鸟蛛毒腺 cDNA 文库构建及其毒素-16序列和
活性分析
卓城洁, 袁 萌, 伍文攀, 邓娟华, 喻振国, 向小亮, 胡朝暾
(怀化学院生物与食品工程学院/ 民族药用植物资源研究与利用湖南省重点实验室,湖南 怀化 418008)
摘要: 家福捕鸟蛛(Selenocosmiajiafu)是一种生活在广西、云南等地的蜘蛛新种。 为了阐明其毒素的分子多
样性和筛选河豚毒素不敏感型(Tetrodotoxin-resistant,TTX-R)钠通道抑制剂,利用SMART 法构建了毒腺全长cDNA
文库,并进行DNA测序和表达序列标签(Expressedsequencetags ,ESTs)聚类分析。 结果表明家福捕鸟蛛毒腺双链
cDNA条带分布在 300~3000 bp。 经测序得到752个高质量的EST序列,去冗余后得到257个唯一序列,其中毒素
序列438条。 家福捕鸟蛛毒素-16(Jiafu toxin-16,JF-16)是从家福捕鸟蛛粗毒中分离得到的1种分子量为3954.616
的哺乳类神经毒素,其全序列为 H N-ECTKLLGGCTKSSECCPHLGCRRKWPYHCGWDGTF-COOH。 研究结果揭示
2
JF-16的全长cDNA为518bp,编码87个氨基酸。 全细胞膜片钳试验结果表明JF-16对大鼠背根神经节(Rat dorsal
root ganglion ,DRG)细胞TTX-R钠通道具有抑制作用。 说明JF-16是一种潜在的具有镇痛活性的蜘蛛毒素。 本研
究有利于开展家福捕鸟蛛毒腺转录组研究和JF-16潜在镇痛活性分析。
关键词: 家福捕鸟蛛; 蜘蛛毒腺; cDNA文库; 家福捕鸟蛛毒素-16
中图分类号: Q785 文献标识码: A 文章编号: 1000-4440(2018)01-0011-09
Venom gland cDNA library constructionfrom the spiderSelenocosmiajia-
fu and sequence and activity analysis of Jiafu toxin-16
ZHUO Cheng-jie, YUAN Meng, WU Wen-pan, DENG Juan-hua, YU Zhen-guo, XIANG Xiao-liang,
HU Zhao-tun
(College of Biological and Food Engineering,Huaihua College/ Key Laboratory of Research and Utilization of Ethnomedicinal Plant Resources of Hunan
Province,Huaihua418008,China)
Abstract: Selenocosmiajiafu (S.jiafu) isanew speciesof spider living inYunnan and GuangxiProvinceof China.
In order to investigatethetoxin molecular diversity and screenfor tetrodotoxin-resistant(TTX-R) sodium channel inhibitors
from the crude venom of theS.jia
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