还原敏感性喜树碱聚合物前药合成与表征-化学专业论文.docxVIP

I I 还原敏感性喜树碱聚合物前药的合成与表征 摘要 摘 要 喜树碱（Camptothecin，CPT）是一种具有抗癌活性的生物碱，对肝癌、大肠癌、 肺癌和白血病等多种肿瘤有抑制作用，但因其水溶性差、结构不稳定、毒副作用大， 很难在临床应用。聚磷酸酯具有良好的生物相容性、生物可降解性，侧链可被修饰 键合其他基团或分子链，在生物医药领域具有十分重要的意义。葡聚糖是天然多糖 的一种，具有良好的生物相容性和水溶性、生物可降解、且来源广泛，在药物控释 载体中有广泛的应用。为了改善喜树碱的水溶性、增加药物稳定性、降低毒副作用 及提高生物利用度，本论文设计合成了一种含二硫键和叠氮基的喜树碱衍生物，然 后将喜树碱衍生物通过点击化学反应，分别键合到侧基含炔基的聚磷酸酯和葡聚糖 的侧链上。对所得到的聚合物前药进行化学结构和生物应用方面的研究。本论文的 工作主要分为以下两个部分： 一、还原敏感性聚磷酸酯键合喜树碱高分子前药 (PBYP-g-ss-CPT)-b-PEEP 的 合成、表征及性能研究 还原敏感喜树碱(CPT)前药的设计中使用二硫碳酸酯键将喜树碱连接到聚磷酸 酯（PBYP-b-PEEP）骨架上，使得前药在细胞内还原条件下胶束结构被破坏，快速 释放 CPT 原药。该聚合物前药(PBYP-g-ss-CPT)-b-PEEP 主要通过开环聚合和一价铜 催化的叠氮-炔基环加成作用（CuAAC）的点击化学反应制得。高分子前药的化学 结构通过核磁共振波谱（1H NMR、13C NMR、31P NMR）、高效液相色谱（HPLC）、 红外光谱（FT-IR）进行表征，分子量及分子量分布通过凝胶渗透色谱（GPC）表征。 利用荧光探针法、动态光散射（DLS）及透射电子显微镜（TEM）对高分子前药的 自组装行为进行研究。结果表明，聚合物前药(PBYP-g-ss-CPT)-b-PEEP 在水溶液中 能够自组装形成分散均匀的球形胶束，且胶束粒径在 160 nm 以下。DLS 结果表明， 聚合物胶束在中性条件下相对稳定存在，而在还原条件下胶束会破坏。体外药物释 II II 摘要 还原敏感性喜树碱聚合物前药的合成与表征 放的结果表明，纳米胶束的 CPT 释放是以 GSH 介导的方式。MTT 实验结果显示， 聚磷酸酯骨架具有良好的生物相容性低毒性，而喜树碱前药有抑制人类肝癌细胞 （HepG2）增殖的能力。此外，活细胞工作站监测体外内吞结果表明，聚合物前药 胶束(PBYP-g-ss-CPT)-b-PEEP 能够成功被内化进入 HepG2 细胞，释放出药物。 二、还原敏感性葡聚糖键合喜树碱高分子前药 Dex-g-ss-CPT 的合成、表征及 性能研究 为了提高喜树碱的水溶性，增加药物的稳定性，将含二硫键和叠氮基的喜树碱 衍生物通过点击化学反应键合到炔基修饰的葡聚糖（Dex）侧链上，制备还原敏感 性葡聚糖键合喜树碱高分子前药 Dex-g-ss-CPT。高分子前药的化学结构通过核磁共 振波谱（1H NMR）、高效液相色谱（HPLC）、红外光谱（FT-IR）进行表征。利 用荧光探针法、动态光散射（DLS）及透射电子显微镜（TEM）研究高分子前药的 自组装行为。结果表明，高分子前药 Dex-g-ss-CPT 在水溶液中能够自组装形成分散 均匀的球形胶束。体外药物释放的结果表明，在 GSH 条件下，载药纳米胶束可以快 速释放 CPT。MTT 实验结果显示炔基修饰的葡聚糖骨架具有良好的生物相容性和低 毒性，而喜树碱前药有抑制 HepG2 细胞增殖的能力。 关键词：癌症治疗、喜树碱前药、聚磷酸酯、葡聚糖、“点击”化学、还原敏感、 药物控释 作 者：张庆庆 指导老师：倪沛红 教授 PAGE PAGE IV 还原敏感性喜树碱聚合物前药的合成与表征 ABSTRACT Abstract Camptothecin (CPT) is a kind of alkaloids with anti-cancer activity which has therapeutic effect to a wide variety of tumors such as liver cancer, colorectal cancer, lung cancer and leukemia. However, the development of CPT as a therapeutic agent has been severely hampered by its poor aqueous solubility, which can lead to rapid blood clearance and unpredictable efficacy following intravenous admi