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上海海
上海海洋大学硕士学位论文
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上海海洋大学学位论文原创性声明
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日期: 年 月 日
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不保密 □
学位论文作者签名: 指导教师签名:
日期: 年 月 日 日期: 年 月 日
海鞘降血脂有效部位的利用技术研究
摘 要
随着人们生活水平的提高,高血脂症发病率高,危害大,降血脂 药物或功能食品的需求旺盛,其中多不饱和脂肪酸是降血脂功效成分 之一。海鞘是一类典型的海洋污损生物,过度繁殖,严重影响海洋生 态环境。国外学者在对其进行抗肿瘤药物的研发中已取得了举世瞩目 的成就;海鞘同样是富含多不饱和脂肪酸的重要生物资源,我们前期 研究发现,某些海鞘脂溶性提取物具有一定的降血脂活性,因此作为 降血脂天然药物或功能食品的新资源,具备较好的开发利用潜力。
目前国内外对星座短腹海鞘(Aplidium constellatum)和皱瘤海鞘
(Styela plicata)降血脂脂溶性成分的文献报道较少,而且大部分集中 在其他活性次级代谢产物的分析上,鲜有对其降血脂活性的研究报道。 为了开发降血脂天然药物或功能食品的新资源,本研究在前期研究工 作的基础上,开展两种海鞘原料中脂溶性成分的季节变化研究,以及 有效部位的提取工艺、质量分析和化学成分背景研究,为将来海鞘降 血脂有效部位的产品开发奠定基础。
选取富含多不饱和脂肪酸的海鞘优势物种——星座短腹海鞘和皱 瘤海鞘为研究对象,利用溶剂低温动态提取的方法对不同时间同一地 点及同一时间不同地点采集的海鞘样品的脂溶性成分进行提取,计算 提取率并探究脂溶性成分的季节性变化规律,建立原料质量标准。结
I
果表明,随季节的变化,同一地点采集的星座短腹海鞘样品其脂溶性
成分提取率有所不同但无明显差异;同一时间不同地点采集的皱瘤海 鞘,其脂溶性成分的提取率自北向南呈递增趋势。综合提取率及可采 集生物量因素,认为用于提取脂溶性部位的星座短腹海鞘的最佳采集 时间为第二、三季度,皱瘤海鞘最佳采样时间为第二季度。
采用正交试验法对两种海鞘脂溶性成分的提取工艺进行优化,以 提取率、类胡萝卜素的含量 2 项指标评定方法是否可行。通过正交试 验法确定 2 种海鞘降血脂有效成分的最佳提取条件组合均为 A3B3C1, 即料液比 1:1.5(W/V)、提取时间 8min、溶剂配比(正丁醇:乙酸 乙酯)1:2(V/V)。最后通过提取验证实验表明:此条件组合是提取 2 种海鞘脂溶性有效成分的最优条件。
采用气相色谱(GC)法、高效液相色谱(HPLC)法对海鞘脂溶 性有效成分的质量进行了分析, 发现在两种海鞘的上述提取物 HPLC 分析中,磷脂含量相对较高,达到 21.9?51.6%,而 EPA+DHA 含量低, 仅有 1.0~5.7%。
为了更好地了解海鞘资源的化学物质基础,还对皱瘤海鞘的化学 成分进行了初步研究,而前期研究完成的星座短腹海鞘的化学成分可 见于文献。通过大孔树脂柱、MCI、硅胶柱、Sephadex LH-20 凝胶等 柱层析法及 HPLC 对皱瘤海鞘提取物进行分离纯化,经质谱、核磁共 振等波谱分析法对分离纯化得到的化合物进行结构鉴定。最终从皱瘤 海鞘的总提取物中分离鉴定 11 个化合物,分别为:(1)胆甾-5-烯-3β-
II
醇、(2)4,8-二烯-鞘氨醇-十六碳酸酰胺、(3)胞嘧啶核苷、(4)2-
脱氧尿嘧啶核苷、(5)腺嘌呤核苷、(6)鸟嘌呤核苷、(7)2’-脱氧 胸腺嘧啶核苷、(8)3-(2-磺基乙基氨基)-癸-7-烯酸、(9)色氨酸、
(10)2,3,4,9-四
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