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胆宁片治疗非酒精性脂肪性肝病的实验研究 王才华1庞智2 (1江苏省张家港市广和中西医结合医院消化内科江苏张家港215633) (2江苏省苏州市立医院消化内科 江苏苏州2 15008) 【摘要】背景：非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是一种发病率较高的常见病，其 确切的病因和发病机制尚未完全明确。祖国医学治疗NAFLD具有一定的优势， 但迄今临床尚缺乏理想的中药制剂，故探索治疗NAFLD的有效药物具有重要的 意义。目的：我们在前期的临床研究表明，胆宁片对NAFLD有较好的治疗作用， 木研究旨为进一步探讨胆宁片对NAFLD的治疗作用机理，从而为该药临床应用 提供较好的理论及实验依据。方法：选用50只健康雄性SD大鼠，随机分为五 组：正常组，模型组，胆宁片低、中、高剂量治疗组。除正常组外，其余各组 大鼠用含有高蛋黄粉、高胆酸钠的饲料喂养。同时予药物干预，胆宁片低、中、 高剂量治疗组分别以lg/kg体重、2g/kg体重、4g/kg体重灌胃，模型组与正常 组用0.9%的生理盐水按1 ml/100g体重灌胃。各组大鼠均日灌胃一次，连续用 药8周。腹腔麻醉、腹主动脉采血，检测血清肝功能(ALT、AST)、甘油三脂(TG)、 总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL?C)、肿瘤坏死因子(TNF?alpha;)、瘦素(LEP)； 即刻剖腹取肝脏，测量肝湿重，计算肝指数，然后取肝脏标木做光镜观察肝脏结 构。结果：胆宁片能显著改善大鼠肝脏组织的脂肪变性，降低异常升高的血清 ALT AST,降低脂肪细胞因子(TNF-alpha; LEP等)的高表达，胆宁片高剂量 组对上述指标的改善尤为明显。结论：胆宁片的治疗机理可能与降低脂肪细胞 因子(TNF-alpha; LEP)的表达、改善肝功能以及调节脂代谢紊乱有关。该药 是治疗脂肪肝的有效中成药。 【关键词】非酒精性脂肪性肝病 胆宁片大鼠机制 【中图分类号1R969.4【文献标识码】A【文章编号］2095-1752(2012)09-0021-03 自上世纪90年代开始,非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD）已成为发达国家和地区最常见的肝脏疾病之一，成为健康体检 者血清转氨酶异常的首要原因［1,2］o近年来，随着我国社会经济的发展，人们生 活习惯和饮食结构的改变以及影像学检查的普及,NAFLD的发病率逐年增加，已 经严重威胁着我国人民的身体健康。迄今国内尚缺乏治疗NAFLD的特效药物。 胆宁片是以中医“六腑以通为用”理论为指导开发的治疗肝胆系统疾病的现代中 成药。随着药理和临床研究的不断深入，发现胆宁片对NAFLD有较好的治疗作 用，是临床上治疗NAFLD的主要辅助药物［3］。为此，我们前期临床研究⑷表明： 胆宇片对改善患者临床症状，肝功能和血脂等指标的降低以及肝/脾CT比值的提 高等方面有很好的疗效，但其机理尚未完全阐明。本项研究通过采用高脂饮食造 成复合型的NAFLD动物模型，进一步探讨胆宁片对NAFLD的治疗作用机理，从 而为该药临床应用提供较好的理论及实验依据。 一、材料和方法 ?实验材料 1.1实验动物：雄性SD大鼠50只，清洁级，体重为200-230克，动物 试验采用自然光，温度湿度恒定，自由饮水，饲料为苏州人学医学院试验动物中 心提供标准颗粒饲料。 1.2实验饲料：包括胆固醇，蛋黄粉，胆酸钠，猪油等成分。 1.3实验药物：胆宁片，由上海市和黄药业股份有限公司生产，0.3克/ 片，加生理盐水配成lg/100ml溶液，分装瓶中备用。 1.4实验试剂：ALT试剂盒、AST试剂盒、TC试剂盒、TG试剂盒、HDL-C 试剂盒＞TNF-alpha;试剂盒、LEP试剂盒，均由解放军总医院科技开发中心提供。 ?实验方法： 2.1动物分组：大鼠适应性喂养一周，确认健康后，将大鼠称重按随机 数字表随机分为5组，每组10只。即正常组、模型组、胆宁片低剂量治疗组（简 称低剂量组）、胆宁片中剂量治疗组（简称中剂量组）、胆宁片高剂量治疗组（简 称高剂量组）。 2.2饲养环境：50只犬鼠分笼喂养于5个等人的人鼠笼喂养笼中，每笼 10只，充足饮水，安静、干燥、通风，室温平均(20plusmn;2 ) °C,明暗各12 小时的普通级动物实验室内。 2.3造模方法：除正常组普通饲料喂养外，其余4组均采用高脂饲料喂 养造模法，参考文献⑸建立高脂饮食性脂肪肝模型，即在82.5%基础饲料基础上 加10%猪油、5%蛋黄粉、2%胆固醇、0.5%胆酸钠。具体制作方法：先将猪油 溶化，然后把胆固醇、蛋黄粉、胆酸钠按比例溶于猪油内，最后倒入普通饲料中 混匀。实验动物自由饮水和进食，喂养至第8周末最后一次给药禁食12h后处死 取材。 2.4给药方法：正常及模型对照组不给药；胆宁片低、中、