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南方农业学报 Journal of Southern Agriculture 2018，49（1）：1-7
1期 ·1·
ISSN2095-1191；CODENNNXAAB
DO ：10.3969/j.issn.2095-1191.2018.01.01
葛根SCoT-PCR反应体系优化及引物筛选
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尚小红，严华兵 ，曹 升 ，张尚文，谢向誉 ，王 艳 ，欧昆鹏
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（广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室，南宁 530007 ；广西农业科学院 经济作物研究所，南宁 530007 ；
3 广西农业科学院 生物技术研究所，南宁 530007）
摘要：【目的】优化葛根SCoT-PCR反应体系，筛选适用于葛根的SCoT引物，为利用SCoT分子标记进行葛根种质
资源鉴定、遗传多样性分析及分子标记辅助育种提供技术支持。【方法】采用正交设计对SCoT-PCR反应体系中的
DNA模板量、dNTPs浓度、Mg2+浓度、Taq DNA聚合酶量和引物浓度5个因素进行优化，利用最佳SCoT-PCR反应体系
筛选出适用于葛根的SCoT引物，并对该体系进行验证。【结果】最佳葛根SCoT-PCR反应体系20.00 µL ：DNA模板
50.00 ng ，dNTPs 0.25 mmol/L ，Mg2+ 1.50 mmol/L ，引物 0.80 μmol/L ，Taq DNA 聚合酶0.50 U 。利用该体系从36条
SCoT引物中筛选出35条可从葛根中扩增出清晰条带的引物。使用3条引物对18个葛根材料进行PCR扩增，PCR产物
表现出良好的重复性、稳定性和丰富的多态性。【结论】建立的最佳葛根SCoT-PCR反应体系和筛选获得的35条SCoT
引物可适用于葛根种质资种鉴定、遗传多样性分析、相关分子标记开发等研究。
关键词：葛根；SCoT-PCR ；反应体系优化；引物筛选
中图分类号：S567.03 文献标志码：A 文章编号：2095-1191（2018 ）01-0001-07
OptimizationofSCoT-PCRreactionsystemandprimer
selectionforPuerariaDC.
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SHANG Xiao-hong ，YAN Hua-bing ，CAO Sheng ，ZHANG Shang-wen ，
1 3 3*
XIE Xiang-yu ，WANG Yan ，OU Kun-peng
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( Guangxi Crop Genetic Improvement and Biotechnology Key Lab ，Nanning 530007
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