急性心肌梗死后冠脉内移植自体骨髓单个核细胞与间充质干细胞对心脏结构和功能的影响-内科学专业论文.docxVIP

中文摘要胞)、L趣’、c翅t牛细胞和各种单克隆干细胞等口BM忒烈Cs是 中文摘要 胞)、L趣’、c翅t牛细胞和各种单克隆干细胞等口BM忒烈Cs是 抽得骨髓利用淋巴分离液(percol要液)经过梯度密度离心法 得到的多个单核细胞混合。集成了所有的骨髓干细胞成分。 MSCs存在于全身结缔组织和器官间质中，以骨髓间充质中 含量最为丰富，具有贴壁生长性、非吞噬性、成纤维细胞样 和克隆性生长等生物特性。目前认为干细胞移植对于心肌梗 死有一定的治疗作用，但对于二者治疗心梗的比较研究却很 少。本研究拟用实验动物猪建立触蛆模型，抽取骨髓，分 离得到BMm烈Cs，并加以培养获得MSCs，使用诱导剂促 其向心肌细胞分化。使用冠脉介入的方法将BM．僦s及诱 导的MSCs移植入心梗部位。比较二者对实验动物心脏结构 和功能的改变，探讨冠脉内移植诱导的MSCs能否进一步改 善心肌梗死后短期内心脏的结构和功能，为今后的临床治疗 提供依据。 方法：选择36只8～1 2个月龄的小型猪为实验对象。 随机分为三组：骨髓单个核细胞移植组(BMm烈Cs移植组)、 经诱导骨髓间充质干细胞移植组(淞Cs移植组)、对照组每 组1 2只。 术前抽取BM．MNCs移植组及MSCs移植组实验用猪的 骨髓，分离获得BM．MNCs。MSCs移植组先将骨髓单个核 细胞筛选、分离、培养获得MSCs，培养至第2代时加用5． 氮杂胞苷f5．azae蛳d访e，5．A Z A)诱导培养2铀。移植术前均 使用胶体金标记。 麻醉后，使用穿刺或切开直视穿刺方法在股动脉或颈外 动脉置入鞘管，行冠脉造影，于前降支的第一对角支以远使 用球囊阻断血流，制作筒诅模型。60分钟后撤去球囊恢复 中文摘要血流9 中文摘要 血流9 BM忒烈Cs移植组使用ov盱她e州i：re(OTW)球囊于 前位置阻断血流后，注入骨髓单个核细胞。溯Cs移植组以 相同方法建立心梗模型并移植诱导培养的MSCs。对照组在 制成心梗模型后用同样方法注入等量培养基。 分别于制模前及术4周后行超声心动图检查，探测左心 室舒张期末直径(LVEDd)和收缩期末直径(n僵Ds)，并计算左 心室短轴缩短率(’FS)，1采用Simpson法澳8量并计算左心室射 血分数(¨惩F)作为心脏收缩功能的指标。同时探测主动脉 (A01宽度，舒张末期室间隔厚度(ⅣS)，左房内径(LA)； 左室后壁厚度(LvPW)以及LVEDd和LVEDs作为心脏结 构改变的指标。使用1 6节段分段法计算室壁节段运动指数 (WMSI)。 细胞移植术后4周处死实验动物，取心脏标本，观察室 壁瘤出现情况，分别于梗死区、梗死边缘区及正常区域取得 心肌标本，分别用于光镜检查及透射电镜检查。光镜标本固 定、包埋、切片并行姬染色，每张砸切片随机取8个视 野，计算每高倍镜(×400)视野的毛细血管数的总量，每个样 本观察5张切片，取平均值。透射电镜观察胶体金标记的移 植细胞的存活、分化情况。 所有数据输入SPSS 11．O统计软件包进行统计。计量资 料以均数±标准差表示；组内造模前后自身对照使用配对T 检验：组间使用单因素方差分析，如有统计学差异则进行两 两比较的q检验；检验水准以PO．05为差异有统计学意义。 结果： 1造模结果27只实验动物存活。术后心电图及心肌钙蛋白 I证实心梗模型制作成功。 中文摘要 中文摘要 2超声心动图结果 2．1术前BM忒斟Cs移植组、MSCs移植组及对照组的I MeF 分别为(64．81±4．69％；60．86±6．04％；64．2S±4．17％)，FS 分别为(34，79±3。44％；3 1．59±4．72％；34。47±3。1 9％)，三组 之间差异无统计学意义(P分别为O．2064和O．1 659)。术后4 周，三组LvEF分别为(58．52±4．86％；56．55±5．45％；46．46 ±9。84％)，FS分别为(30．27±3．1 7％；28．92±3．48％：23．1 8 ±6．00％)三组问差别有统计学意义(P分别为O．o。3 1和 0。0058)，两移植组均高于对照组。BMm烈Cs移植组U压F、 FS略高于MSCs移植组，但差异无统计学意义(PO．05)。 与术前相比，三组术后4周IV班?、FS均下降，差别有统计 学意义(P均O．05)口 2．2三组问AO、LA、L、砸Dd及LvEDs术前均无差异(P均 O．05)，术后4周较术前均有不同程度的增加，对照组的LA、 LvEDd及LvEDs扩张较两移植组大，差异有统计学意义，P 值分别为0．035 l；O．0023和O．OOOl；AO无差异(P=O．1522)； 三组IVS和LVPW术后4周均较术前减小，其中ⅣS差异 有统计学意义(P：O．0404)，对照组比移植组变薄更显著； ”坤W差异无统计学