棘孢木霉菌溶磷特性及其对植物抗盐性的影响-微生物学专业论文.docxVIP

山东师范大学硕士学位论文 山东师范大学硕士学位论文 万方数据 万方数据 1.1.3 培养基34 1.1.4 培养基质34 1.1.5 主要试剂34 1.1.6 主要仪器35 1.2 实验方法 35 HYPERLINK \l _TOC_250007 1.2.1 棘孢木霉菌 Q1 孢子悬液的制备 35 HYPERLINK \l _TOC_250006 1.2.2 棘孢木霉菌 Q1 溶磷与 pH 值的关系 35 HYPERLINK \l _TOC_250005 1.2.3 棘孢木霉菌 Q1 磷酸酶和植酸酶活力测定 36 1.2.4 黄瓜种子处理36 HYPERLINK \l _TOC_250004 1.2.5 棘孢木霉菌 Q1 发酵液的制备 36 1.2.6 水培试验设计36 2 结果与分析 37 HYPERLINK \l _TOC_250003 2.1 棘孢木霉菌 Q1 溶磷与 pH 值的关系 37 HYPERLINK \l _TOC_250002 2.2 棘孢木霉菌 Q1 磷酸酶和植酸酶活力测定 39 HYPERLINK \l _TOC_250001 2.3 棘孢木霉菌 Q1 发酵液对盐胁迫下黄瓜幼苗生长表型的影响 40 HYPERLINK \l _TOC_250000 2.4 棘孢木霉菌 Q1 发酵液对盐胁迫下黄瓜幼苗根长茎长的影响 41 3 讨论 42 第六章 酸性磷酸酶的纯化及其对拟南芥的促生作用 44 1 材料与方法 44 1.1 实验材料 44 1.1.1 供试菌株44 1.1.2 供试植物44 1.1.3 培养基44 1.1.4 主要试剂44 1.2 实验方法 45 1.2.1 棘孢木霉菌 Q1 孢子悬液的制备 45 1.2.2 酸性磷酸酶的分离纯化46 1.2.3 纯度检测46 1.2.4 分子量测定47 1.2.5 蛋白质含量测定47 1.2.6 酸性磷酸酶对盐胁迫下拟南芥生长的影响 47 2 结果与分析 48 2.1 酸性磷酸酶的分离纯化和分子量测定 48 2.1.1 纯化结果48 2.1.2 酸性磷酸酶分子量的测定 50 2.2 酸性磷酸酶对盐胁迫下拟南芥生长的影响 51 3 讨论 53 全文结论 55 参考文献 56 致谢 65 攻读学位期间发表论文情况 66 iii 棘孢木霉菌溶磷特性及其对植物抗盐性的影响 摘要 磷素是植物生长发育所需的大量营养元素之一，对于促进植物的新陈代谢具有重要作 用。虽然我国土壤总磷量相当可观，但能被植物直接吸收利用的有效磷含量普遍偏低，土 壤缺磷现象严重。农业生产中主要通过施用速效磷肥缓解植物的缺磷症状，但长期施入大 量的磷肥会导致土壤的盐渍化，从而阻碍农作物对土壤养分的摄入，加重植物的缺磷症状， 不利于绿色农业的可持续发展。 研究表明，植物根际有益微生物能够转化难溶性磷，提高植物对磷元素的吸收。木霉 菌（Trichoderma spp.）是当前农业生产中最具应用潜力的生防微生物之一，近年来发现， 某些木霉菌种具有促进作物生长的特性，如溶磷、产生 IAA、嗜铁素及 ACC 脱氨酶等。 但有关木霉菌的溶磷作用及其机制以及对植物抗逆境胁迫能力的影响，目前国内外尚未进 行深入研究。 本文从实验室已鉴定的生防木霉菌中筛选到一株高溶磷棘孢木霉菌（Trichoderma asperellum），通过研究该菌对不同胁迫因子作用下土壤中可溶性磷的转化以及水培试验， 确定了木霉菌转化难溶性有机磷和无机磷对黄瓜幼苗的促生作用；从木霉菌产生磷酸酶和 植酸酶的角度研究了木霉菌对难溶性有机磷的转化机制，通过利用纯化的酸性磷酸酶转化 难溶性有机磷，分析其对盐胁迫下拟南芥生长的影响，揭示了木霉菌酸性磷酸酶在增强植 物抗盐性中的作用。具体结果如下： 1、分别采用液体培养法和平板溶磷圈法对本实验室保藏的 8 株生防木霉菌溶解无机 磷和有机磷能力进行比较，筛选出一株高溶磷木霉菌株，编号为棘孢木霉菌 Q1 （Trichoderma asperellum Q1）。 2、研究了接种棘孢木霉菌 Q1 土壤全磷与有效磷含量的变化情况。结果表明，接种菌 株 Q1 的土壤中有效磷含量明显增加，全磷含量无明显变化，证明了木霉菌 Q1 能够将土壤 中的难溶性磷转化为有效磷。 3、通过模拟常见的土壤状况，分析了缺铁、盐胁迫、酸胁迫和碱胁迫因子对棘孢木 霉菌 Q1 及其转化土壤难溶性无机磷（磷酸三钙、磷酸氢钙）和有机磷（植酸钙）的影响，