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课件:梅毒螺旋体抗体的模板.ppt
TPPA试验原理示意图 明胶颗粒+ 梅毒抗原=抗原致敏颗粒 +血液中抗体 =抗原抗体凝集 + 明胶颗粒+梅毒抗原 =抗原致敏颗粒 + 抗原致敏颗粒+血液中抗体 =抗原抗体凝集 THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 TPPA试验结果判读敏感性 4+: 粒子光滑覆盖整个孔底,有时边缘有 折叠 3+: 粒子光滑覆盖大部分底 2+:粒子光滑聚集覆盖孔底,周围有一细胞环 病期 1+: 粒子光滑集聚覆概孔底,周围有一明显细胞环 ±: 粒子沉集孔底,中央形成一小点 –: 粒子紧密沉积孔底中央 ELISA/ CLIA ELISA试验是用重组梅毒螺旋体抗原包被固相 板条,加上梅毒血清和单克隆抗体酶标记物,形成抗原抗体复合物与酶标记物结合,用酶联 检测仪判定试验阳性反应。 本法可用于大样本血清检测。 化学发光法的临床应用意义基本同ELISA 化学发光法的敏感性? 梅毒免疫层析快速检测方法 梅毒免疫层析快速检测方法(血清、血浆法) 梅毒螺旋体抗原血清试验临床意义 作为非梅毒螺旋体抗原血清试验(如RPR、TRUST等)初筛阳性标本的确证试验,排除RPR、TRUS 假阳性。 不能区分既往感染和现症感染,应结合非梅毒螺旋体抗原血清试验结果进行诊断。 TPPA等梅毒螺旋体抗原血清试验不能作为疗效观察的指标。 梅毒血清学试验结果解释 试验结果 参考结果解释 梅毒螺旋体抗原血清试验 非梅毒螺旋体抗原血清试验 阳性 阳性 可能为现症梅毒 阴性 阳性 非梅毒螺旋体抗原血清试验假阳性 阳性 阴性 临床治愈的早期梅毒 (既往感染者) 阴性 阴性 排除梅毒感染或极早期感染 问题:此结果解释适用于先天(胎传)梅毒吗? 先天(胎传)梅毒的实验室诊断依据 查到螺旋体 。 其抗心磷脂抗体滴度持续上升,可用RPR半定量试验每月检测1次,连续6个月,检测效价,效价增高或稳定在高水平,表明是先天梅毒。如抗体来自母体IgG,通常在2-3月内消失。 其抗心磷脂抗体滴度高于其母亲四倍(2个稀释滴度)。 检测抗梅毒的IgM特异性抗体阳性 。 随访18个月观察抗体的变化(哪一类抗体?) 梅毒IgM抗体(TP-IgM) IgM抗体的产生是感染后的早期体液免疫应答反 应。IgM分子比IgG较大,所以IgM抗体不能通过胎盘 屏障。而母亲的IgG抗体可以通过胎盘屏障传给胎儿。 因此若在新生儿血中检测到IgG抗体不能作为先天梅毒的诊断依据,而IgM抗体可为先天梅毒的诊断依据。 IgM抗体检测其特异性较高,但敏感性较低。因 此,IgM抗体检测阴性,不能排除先天梅毒感染。 先天(胎传)梅毒的实验室诊断依据 查到螺旋体 其抗心磷脂抗体滴度持续上升(TRUST,RPR) 其抗心磷脂抗体滴度高于其母亲四倍(2个稀释滴度) 检测抗梅毒的IgM特异性抗体阳性 随访18个月观察抗体的变化(特异性抗体) 规范化梅毒实验室检测基本要求 一、根据目的选择检测方法及检测策略。 二、人员 检测技术人员需经过上岗培训。接受上岗培训内容应包括:梅毒检测相关基础知识、梅毒实验室检测技术基本实验操作要求、结果解读及临床意义、质量保证与生物安全等。 三、试剂 常规血清学检测应采用经国家食品药品监督管理局注册批准的 试剂。因不同厂家生产的同一种试剂的敏感性和特异性存在一定的 差异,建议选择临床质量评估敏感性和特异性高的试剂。所有试剂须严格按要求妥善保存,并控制在有效期内使用。 血清学检测试剂的种类 非梅毒螺旋体抗原血清试验 : 快速血浆反应素环状卡片试验 (RPR ) 甲苯胺红不加热血清试验(TRUST) 性病研究实验室试验 (VDRL) 梅毒螺旋体抗原血清试验 : 梅毒螺旋体颗粒凝集试验 (TPPA) 梅毒螺旋体血球凝集试验 (TPHA) 梅毒酶联免疫吸附试验(ELISA) 梅毒免疫层析法-梅毒快速检测 (RT) 荧光螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS) 化学发光免疫分析法(CLIA) 梅毒IgM抗体检测(IgM) 梅毒螺旋体蛋白印迹试验(WB) PCR技术应用于检测梅毒螺旋体DNA 特异性强,敏感性高,是目前诊断梅毒螺旋体的先进方法。(1)标本采集和处理:可采集局部分泌物、淋巴结液、羊求、血清、脑脊液等标本,用煮沸或低速离心
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