超级杂交液芯片-天恩泽.PDF

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列 系 测 检 交 杂 CAT#:130905-10 低温运输,-20℃保存 超级杂交液(芯片) SuperHyb Solution for Chip 使用手册 V1.0 北京天恩泽基因科技有限公司 北京市海淀区上地信息路 26 号北京市留学人员海淀创业园中关村创业大厦 506 网址: ;电话:400-6765278;电邮:order@ 产品及特点 基因芯片是将大量靶基因(DNA 片段)有序地、高密度地点在玻璃片或 硅片或塑料片上等载体上所形成的矩阵。基因芯片杂交一般情况下是将待测 的两种样品 (主要是RNA 样品)分别用 Cy3 和 Cy5 两种荧光染料标记 ,制 备成探针与芯片杂交,杂交信号用激光扫描仪检测,计算机分析检测结果, 可获得类似与传统的点杂交的杂交数据,以达到快速、高效、高通量及平行 性的分析表达谱 的目的。本产品为即用型芯片专用的杂交液,可用于各种标 记的探针(主要是 Cy3 和 Cy5 标记的 RNA 探针)跟基因芯片的杂交实验 。 规格及成分 成分 编号 热封袋包装 本产品 130905 10 mL 使用手册 1 份 运输及保存 低温运输,-20℃保存 ,有效期一年。 自备试剂 印迹膜、去离子水、20 ×SSC 使用方法 一、预杂交 (下面的操作以载玻片为例) 预杂交的主要作用是在加入标记探针之前从载玻片上洗去未结合的靶基 因(靶 DNA),同时封闭载玻片表面可能与标记探针进行非特异性结合的反 应性基团(如自由氨基),从而降低非特异的背景。所有的预杂交、杂交、 杂交后洗涤都在 Coplin 染缸或者显微镜载玻片盘等杂交盒中进行。 1. 在室温下,将载玻片浸入装有本产品的杂交盒中 (本产品的用量根据杂 交盒的大小决定,以能够浸埋载玻片为准)。将杂交盒在 42℃水浴中放 置 30~45 分钟 ,无需震动。 2. 在室温下用去离子水清洗载玻片数次。 3. (可选)用 100%异丙醇(HPLC 级)漂洗载玻片。 4. 在加入杂交溶液之前,空气晾干或者通过离心(室温下以 2000g 离心 5 分钟 ,有阵列的一面朝外)干燥载玻片 ,将干燥后的载玻片立即用于杂 交。如果载玻片干燥时间超过 1 小时 ,杂交效率可能会迅速下降。 二、杂交 1. 将等同于至少 1 ug polyA RNA 或 100 ug 总 RNA 的 Cy3 和 Cy5 标记 的探针 RNA 混合在一起,最终体积约为 6 μL。如果没有这么多的,则 需要进行 RNA 扩增。 2. 将 6 μL 标记 DNA 和 30uL 本产品在塑料离心管中混合 ,得到杂交液。 3. (可选)将杂交液在微量离心机中 10,000 g 离心 5

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