生物化学文档资料.pptVIP

如果破碎或释放其中一步很快，则成为表观一级释放过程，速率方程分别为： 破碎速率控制的速率过程(kD kR)： dc/dt = kD(cM-c) 释放速率控制的速率过程(kR kD)： dc/dt = kR(cM-c) *凝聚 coagulation *絮凝 flocculation 过滤 filtration *离心 centrifugation *沉降系数 sedimentation coefficient *差速离心 differential centrifugation *区带离心 zonal centrifugation *超离心机 ultracentrifuge 管式离心机 tubular bowl centrifuge *碟片式离心机 disc-type bowl centrifuge 助滤剂 filter aid *细胞破碎 cell disruption 肽聚糖 Peptidoglycan *化学渗透 chemical permeation *高压匀桨 high-pressure homogenization 珠磨机 bead mill *超声波破碎法 ultrasonication 酶溶法 enzymatic lysis *渗透压冲击法 osmotic shock 包含体 inclusion bodies * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 细胞分离－常用离心设备 Decanter centrifuge Multichamber bowl, vertical cut 细胞分离－管式离心设备 A disposable cell separation insert PowerfugeTM one-chamber with scraper 细胞分离－碟片离心设备 (a) Solids-retaining disk bowl, (b) Radial solids-ejecting disk bowl, top feed. (c) Radial solids-ejecting disk bowl, hermetic feed. (d) Axial solids-ejecting disk bowl. (e) Nozzle bowl with pressurized solids discharge. (f) Nozzle bowl with peripheral discharge nozzles. 细胞分离－离心设备比较 管式离心机 优点 结构简单，转速和离心力较大 缺点 沉降面积小、处理能力低； 碟式离心机 优点 转子中存在隔板以增大沉降面积，处理能力大 缺点 结构复杂、转速较低； 细胞分离－离心机处理能力 粒子在径向上的沉降速度 轴向移动速度 完全沉降的边界条件 细胞分离－离心机处理能力 影响因素 处理样品的特性，如密度、粒径等 溶液的特性，如密度、粘度等 离心机机械结构，如r1和r2 操作条件，ω 细胞分离－过滤定义 过滤是利用多孔性介质（如滤布）截留固液悬浮液中的固体粒子，进行固液分离的方法。 过滤本身是一种膜分离技术。在分离细胞、菌体或它们的碎片过程中除了沉降分离方法外，过滤技术也是一种常备的分离方法。 细胞分离－过滤过程受力分析 推动力：过滤操作以压力差为主要推动力； 阻 力：过滤过程的阻力来自多孔性过滤介 质和介质表面不断堆积形成的滤饼 细胞分离－过滤速率 Rm表示介质的阻力； Rc表示滤饼的阻力； μL为滤液的粘度 细胞分离－恒压过滤方程 Ruth恒压过滤方程 其中，K为Ruth恒压过滤系数，表示为 细胞分离－提高过滤速度的途径 采用絮凝或凝聚的方法预处理改变料液的性质，降低滤饼阻力 加入助滤剂以改变滤饼的压缩性指数，提高过滤速度 胞内产物释放－学习要点 理解：各种细胞破碎方法原理、优缺点及其适用范围。 应用：采用不同的细胞破碎方法对不同细胞进行不同程度的破碎。 胞内产物释放－细胞结构（真核细胞与原核细胞） 动物细胞 没有细胞壁，只有由脂质和蛋白质组成的细胞膜 植物细胞 细胞膜外有一层坚固的细胞壁 酵母细胞 细胞壁由葡聚糖、甘露聚糖和蛋白质构成，更加难以破碎 真核细胞 原核细胞 革兰氏阳性菌 细胞壁由肽聚糖层组成，壁厚约15～50 nm，肽聚糖含量为40~90%，细胞壁较革兰氏阴性菌坚固。 革兰氏阴性菌 细胞壁在肽聚糖的外侧还有分别由（1）脂蛋白和（2）磷脂和脂多糖构成的两层外壁层，