课件：荧光定量技术在临床诊断中的应用.ppt

免疫学诊断主要是抗原抗体反应，应用于临床通常在体内产生抗体以后，而许多病原体的免疫学检测存在较长的“窗口期”，不利于对疾病的早期诊断；PCR方法直接检测病原体的DNA/RNA，能大大缩短“窗口期”，其高灵敏度的检测显然也有利于疾病的早期诊断。 疾病的早期诊断 1 乙型肝炎病毒（HBV）; 2. 丙型肝炎病毒（HCV） 3 淋球菌(NGH); 4 人类免疫缺陷病毒（HIV） 5 解脲脲原体(UU) 6 肺炎支原体(MP) 7 单纯疱疹II型 8 人巨细胞病毒（HCMV） 9 人乳头瘤病毒（HPV）6、11 10 高危型人乳头瘤病毒（HPV 8个型） 11 沙眼衣原体(CT) 12 a-地中海贫血 13 结核分支杆菌(TB) 14 新型冠状病毒(SARS) 已获证书 荧光定量PCR技术中国专利 国家重点新产品 多种荧光PCR试剂盒新药证书 多项国家、省部级等科技进步奖 三十余项国家、省部级重点科研项目 业务遍布全国1026家医疗卫生单位 达安烙印 THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 一人世间枯燥　　 结核杆菌引起的感染 肺部感染：原发性肺结核，开放性肺结核。 肺外感染：脑、肾、骨、关节、生殖结核、肠结核、结核性腹膜炎、全身性结核。 常规结核病实验室诊断方法及不足 1. 痰涂片作抗酸染色：阳性率低 、费时 2. 细胞培养“金标准”：周期太长(3-4W) 3. 血清学诊断： a. 接种BCG可出现阳性 b. 不能区分活动性结核病和治愈后留下损伤灶的病人 c. 交叉反应，假阳性 不能早期诊断！容易漏诊、误诊！ TB 荧光定量PCR检测TB-DNA的意义 1. 能稳定检测10copy的TB-DNA ，灵敏度高 ，特异性强 2. 早期、快速、准确地诊断结核病。 痰液、肺及支气管灌洗液——肺结核 血液——播散性结核和各脏器的结核病 　 脑脊液——中枢神经系统结核病 宫颈拭子、尿道拭子——泌尿生殖道结核病 TB 3. 荧光定量PCR检出结核杆菌阳性率显著高于痰涂片抗酸染色和改良罗氏培养法。 4. TB-DNA浓度可用于判断疗效： 痰标本中结核杆菌的数量呈逐渐下降趋势 ，TB-DNA拷贝数下降。根据病原体DNA浓度，对药物治疗及疗效观察提供参考依据 TB 荧光定量PCR检测TB-DNA的意义 CP、MP感染可致咽炎、支气管炎和肺炎，潜伏期约2-3周，通常起病较缓慢。持续性咳嗽。 肺炎衣原体(CP)、肺炎支原体(MP)感染与致病 CP/MP MP肺炎约占非细菌性肺炎的1/3以上，或各种原因 引起的肺炎的l0％。 MP感染与小儿支气管哮喘密切相关。 CP感染与冠心病存在密切的关系 肺癌、支气管扩张患者中CP感染率相对较高 荧光定量PCR用于非典型性肺炎的诊断 意义：1. 直接检测病原体，早期、快速、特异诊断非典 型性肺炎。 2. 治疗方案与细菌、病毒感染的治疗方案不同 3. 流行病学调查。 　TB、MP、CP已被许多医院尤其是妇幼保健医院和儿童医院纳为肺部感染的常规检测项目 MP/CP/SARS 甲型H1N1流感 流行性感冒简称流感，是由甲、乙、丙三种流感病毒引起的急性呼吸道传染病。甲型流感病毒根据其表面(H和N)结构及其基因特性的不同又可分成许多亚型，至今甲型流感病毒已发现的血凝素有16个亚型(H1-H16)，神经氨酸酶9个亚型(N1-N9)。 “猪流感”更名为“甲型H1N1流感” 世界卫生组织4月30日宣布，从当日起，该组织不再使用“猪流感”一词指代当前疫情，而开始使用“A（H1N1）型流感”一词。与之相对应，我国的官方文件从5月1日起相继用“甲型H1N1流感”代替原来的“人感染猪流感”。 世界卫生组织发言人说，之所以更改叫法，是因为“猪流感”一词容易误导消费者，美国和墨西哥等国的猪肉及猪肉制品已明显受到其他国家进口禁令影响。 世界卫生组织的声明说，根据目前掌握的科学依据，此次流行的病毒仅在人际间传播，尚无证据表明它在猪群内传播，或由猪向人传播，也无证据表明人因食用猪肉或相关产品染病。 病 原 学 甲型H1N1流感病毒属于正粘病毒科，典型病毒颗粒呈球状，直径为80 nm~120 nm，有囊膜。囊膜上有许多放射状排列的突起糖蛋白，分别是血凝素HA、神经氨酸酶NA 和M2蛋白。病毒颗粒内为核衣壳