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Chapter8 微生物的遗传 变异和育种;遗传：;表型饰变：;微生物是遗传学研究中的明星：;8.1 遗传变异的物质基础;1928年，F.Griffth作了3组实验:;1944年，Avery精确重复了转化实验，确定了转化因子;2、噬菌体感染实验;3、植物病毒重建实验; 1.细胞水平 2.细胞核水平 3.染色体水平 4.核酸水平 5.基因水平 6.密码子水平 7.核苷酸水平;8.1.2.2 微生物基因组结构的特点;2.真核微生物（啤酒酵母）的基因组;3.原核生物和真核生物的基因组比较;8.1.2.3 原核生物的质粒;2.结构特点;3、质粒的类型;4.质粒在基因工程中的应用 质粒的优点： （1）体积小，易分离和操作 （2）环状，稳定 （3）独立复制 （4）拷贝数多 （5）存在标记位点，易筛选 E. coli的pBR322质粒是一个常用的克隆载体;5.质粒的检测;6.质粒的主要种类;8.2 基因突变和诱变育种;8.2.1.2 突变率 每一世代中发生某一性状突变的几率 8.1.2.3 基因突变的特点;8.2.1.4 基因突变自发性和不对应性的实验证明;8.2.1.5 基因突变及其机制;1、诱发突变： 物理、化学与生物的因素，提高突变率的人为的作法;碱基的置换引起的突变;（2）移码突变：添加或缺失核苷酸，引起阅读错误;（3）染色体畸变：缺失、重复、插入、易位、倒位;2.自发突变;8.2.1.6紫外线对DNA的损伤及其修复;2、切除修复;8.2.2 突变与育种 8.2.2.1 自发突变与育种： 选育 定向培育 8.2.2.2 诱变育种 1.诱变育种的基本环节;2.诱变育种的原则 （1）使用简便有效的诱变剂;Ames试验：利用细菌模型了解潜在化学致癌物的诱变作用;美国加利福尼亚大学的Bruce Ames教授于1966年发明，因此称为Ames试验 具体操作：检测鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhmurium)组氨酸营养缺陷型菌株(his-)的回复突变率 回复突变：突变体失去的野生型性状，可以通过第二次突变得到恢复，这种第二次突变称为回复突变 ;证明Ames试验重要性的应用实例： 国外曾开发了一种降低妇女妊娠反应的药物“反应停”，由于其药效显著，在60-70年代十分流行， 但随后人们就发现畸形儿的出生率明显增高，而且生产畸形儿的妇女大多曾服用“反应停”，后来采用Ames试验发现这种物质的确具有很强的致突变作用，因此这种药物被禁止使用 但如果能在这种药物上市之前就进行Ames试验检测，那么这种大量出生畸形儿的悲剧完全可以避免， ;（2）选用优良的出发菌株 （3）处理单细胞或单孢子悬浮液 （4）使用最佳诱变剂量 剂量 = 强度（浓度）× 作用时间 相对剂量 = 杀菌率 （5）利用协同效应 （6）寻找和利用形态、生理与产量间的相关指标 （7）设计高效率筛选方案 （8）根据具体情况创造新型筛选方案;3、突变株的筛选：（1）产量突变株的筛选 （2）抗药性突变株的筛选 （3）营养缺陷型突变株的筛选;突变株的筛选方法;8.3 基因重组和杂交育种;1、建立了感受态的受体细胞 感受态细胞：具有摄取外源DNA能力的细胞 自然感受态的出现是细胞一定生长阶段的生理特性，受细菌 自身的基因控制； 人工感受态则是通过人为诱导的方法，使细胞具有摄取DNA的 能力，或人为地将DNA导入细胞内 2、外源游离DNA分子（转化因子） ;转化过程（革兰氏阳性菌的转化模型）;噬菌体DNA被感受态细胞摄取并产生有活性的病毒颗粒;人工转化;（二）细菌的转导（transduction）;（三）接合(conjugation);证实接合过程需要细胞间的直接接触的“U”型管实验（ Bernard Davis，1950 ）;接合机制(大肠杆菌的接合机制);F因子的四种细胞形式 ;1） F+×F-杂交;Hfr菌株的F因子插入到染色体DNA上，因此只要发生接合转移转移过程，就可以把部分甚至全部细菌染色