急性髓系白血病M2b型诱导分化和凋亡的研究-内科学(血液学)专业论文.docx

中国#和壕辨土擘俘誊磅竞生牛娃话主摘 中国#和壕辨土擘俘誊磅竞生牛娃话主 摘 要 目的；急性白血病M2b型(AML-M2b)染色体易做产生的AMLl一ETO 融合蛋匀冥豢募集缝蛋鑫脱乙融化酶(HDAC)炊露掺铡AMLI靶基嚣豹 转录是关键的致病机制，并且DNA甲熬化和组礞白脱乙酰化两个重要的转 录攘嘉l孛趸翱态辩存在蛰十分密谚静关联。探讨HDAC帮翻裁苯丁酸铺(pB) 联合DNA甲基化抑制剂5-杂氮脱氧胞苷(5-Aza．CdR)阻断AMLl。ETO 的生渤学功能，消除AMLl一ETO的转浆抑制，诱导AML．M2b自血病细胞 分化和凋亡作用。 材料和方法；体外实验应用MTT比色法观察PB或与5-Aza—CdR联合 对细胞的生长抑制作髑，普遗光学显微镜观察缨腿形态改变，滚式纲臆术 分析细胞周期和检测髓系分化抗原的表达，Annexin V标记、DNA凝胶电 溶积溅式耋窭腿术分撰缨艟壤亡。建立K曩sumi．1缨鼹搽聚移檀瘿模型，凝究 PB对Kasumi。1细胞裸鼠体内致瘤性的影响；评价PB与5-Aza．CdR联合对 操鬣移攘瘩戆疗效，磺究傣痰稼用瓿制。 结果：①PB抑制AML—M2b白血瘸细胞系和原代细胞生长，降低细胞 豹自我更新能力，使细胞阻滞予G。／Gl期，诱导髓系分化抗原CDllb、CDl3 的表达和细胞搦亡，并且上述作用呈剂量依赖性和时间依赖性。细胞凋亡 经过激活Caspase一3途径。②低剂量5-Aza-CdR可以增强PB诱导细胞分 化俸用，傻细溅阻滞予G2／M翅；裹刘爨5-Aza-CdR增强PB黠Kasumi。l 细胞的生长抑制作用和诱导凋亡作用。③通过裸鼠移植瘤模型证实 Kasumi．i经PB薅外培莠蜃獒蘩瘩瞧降低。④PB俸蠹舔药可懿籀裁 Kasumi．1细胞裸鼠移植瘤生长，抑制率达49．07％。诱导移植瘤细胞周期阻 滞、分纯和凋亡，并季牵锈辩瘤盘篱新生，瓣瘤徽敷管密瘦减低。⑤5一Aza-CdR 增强PB体内抗肿瘤活性，肿瘸生长抑制率达到87．46％，发生凋亡和蚀。 血管新生均明魏增加。》灞 结论；体外和体内实验均证明脱乙酰化酶抑露《剂PB能够抑制 AML—M2b自血瘸细胞生长和自我更新能力，使细胞阻滞于G0／G1期；诱 导绥腿部分分纯襄掇亡；DNA甲基纯季牵制裁5-Aza-CdR增强PB的疚 中国协和蜃斜土学博士研露佳毕业话土AML—M2b白血病作用。为临床上应用脱乙酰化酶抑制剂与DNA甲基化抑 中国协和蜃斜土学博士研露佳毕业话土 AML—M2b白血病作用。为临床上应用脱乙酰化酶抑制剂与DNA甲基化抑 制剂联合治疗AML—M2b提供实验依据。 关键词： 白血病，AMLl一ET0；脱乙酰化酶；DNA甲基化；细胞周期 诱导分化；细胞凋亡； 哮回秘和旗斟土擘辩量磷露耋年擘静盘 哮回秘和旗斟土擘辩量磷露耋年擘静盘 一3一 Combined effect of Phenylbutyrate and 5-aza一2-deoxyeytidine in t(8；21)AML leukemia cells in vitro and in vivo ABSTRACT Dysregutation of histone aeetylation has been demonstrated in several hematological neoplasias．It has been reported that U positive interaction between DNA methylation and histone deacetvrlation takes place to inhibit transcription． In t(8；21)AML，a stuble association of AMLl／ETO fusion protein with the nuclear histone deacetylase complex(HDAC)is crucial to repressing transcription of AMLl target genes mad blocking differentiation of hematopoietic precursors．Phenylbutyrate(PB)is a competitive inhibitor of HDACl．5-aza一2’-deoxycytidine f5一Aza—CdR)is potent inhibitor of DNA methylation． We investigated whether PB alone and combination with 5-Aza-CdR could reverse transcription repression and