急性肝衰竭大鼠肠道菌群和内毒素的动态研究-传染病专业论文.docxVIP

浙江大学2003届硕士研究生学位论文急性肝衰竭大鼠肠道茵群和内毒素的动态研究 浙江大学2003届硕士研究生学位论文 急性肝衰竭大鼠肠道茵群和内毒素的动态研究 浙江大学医学院 内科学(传染病) 2000级硕士生 肖党生 导师 李兰娟教授 中文摘要 。 重型肝炎是我国常见的急、危重疾病，死亡率高达65％～90％。感 染是常见的并发症，也是造成患者死亡的重要原因之一。抗生素可以控 制感染，长期大剂量使用使得细菌耐药现象不断增加。不仅如此，抗生 素在杀灭病原菌的同时，也可以造成肠道菌群失调。 导致重型肝炎病人出现感染的病原菌大都来源于肠道内的正常菌 群。这些细菌在生理条件下定植于肠道内，并在种群和数量上保持相对 稳定。重型肝炎的发病过程中存在肠道菌群失调，表现为粪便中的双歧 杆菌等有益菌下降，肠杆菌科细菌过度生长。肠道菌群失调是造成细菌 易位、细菌感染的重要因素，研究肠道菌群的失调可以进一步了解细菌 易位和感染的规律，建立预防细菌感染的微生态学方法皋实验采用大 、 、 鼠肝衰竭模型，研究不同部位肠道菌群、内毒素的动态变化及消长关系。卜、 √ 浙江大学2003届硕士研究生学位论文材料和方法 浙江大学2003届硕士研究生学位论文 材料和方法 1． 实验动物雄性SD大鼠40只，体重200-3009，由浙江省医学 动物中心提供。动物随机分为对照组和急性肝功能衰竭组。对照组(10 只，A组)在实验开始时处死；急性肝衰竭组分别在造模完成后24小时 (12只，B组)和48小时(18只，C组)处死。 2． 主要材料和方法半乳糖胺购于重庆医科大学生化教研室，配制 成20％溶液， 1M的NaOH调pH至7．0。按1．49／kg剂量间隔12小时 腹腔注射半乳糖胺两次建立急性肝衰竭大鼠模型。按本实验室现行方法 配制下列培养基，EMB、EC、TS、EG、NBGT、LBS。 3．标本采集，细菌培养和内毒素测定采右心室血检测肝功能和内 毒素；采门静脉血检测内毒素。无菌条件下采集空肠、回肠及结肠内容 物。稀释后用于肠道内毒素测定，并进行细菌培养计数。采用细菌三级 鉴定法将细菌鉴定到属的水平。 4．统计学分析数据采用均数±标准差表示。根据不同情况采用X2检 验、单因素方差分析和秩和检验。 、＼(飞验结果和讨论 1． 大鼠死亡率观察A组大鼠全部存活。B组大鼠死亡一只，死亡 时问为16～24小时之间，其余大鼠在处死前均有不同程度的精神萎靡， 避食减少，反应迟钝。C组大鼠在24～48小时之间死亡8只：在处死前， 1只大鼠出现狂躁，激惹等症状，处于兴奋状态；4只大鼠在40小时后 3 浙江大学2003届硕士研究生学位论文出现精神好转，嗜睡症状消失，饮食增加并伴随活动增加；其余大鼠处 浙江大学2003届硕士研究生学位论文 出现精神好转，嗜睡症状消失，饮食增加并伴随活动增加；其余大鼠处 死前也伴有不同程度的精神萎靡，进食减少和反应迟钝。 2．肝功能检查结果肝功能检测结果见表一 表一肝功能检测结果 A组(n=10) B组(n=1I) C组(n=10) 总蛋白(∥L) 62．7±4．5 48．9士3 7+4 5l 84-9 7+4 白蛋白(∥L) 34．3士2 4 27．8±2．O” 30 3士3．4++ 球蛋白(叽) 28 6士2．7 21．14-3．2++ 21 54-8．1+} ALl’(U／L) 60．64-1l 4798．0±3341．0+’ 3183士3973十{ AST(U，L、 138 04-24．8 5033．04-3201．O++ 2928 04-2666．O+{ 碱性磷酸酶(U／L) 272．2：t：61．5 639 24-179．8++ 747士421++ 总胆汁酸(umol／L) 11 8士8 5 425．O士99．4+} 262 04-183．0++△ ：望盟塾塞f!竺!型 !!!：! !!：!!丝：!：： 塑：丝!：翌 注：¨表示与A组有显著差异(po 01)△表示与B组差异(po 05) 肝功能检测显示，造模后B、C两组大鼠肝脏出现严重损伤：总蛋 白、白蛋白和球蛋白明显下降；AST、ALT、碱性磷酸酶、总胆红素和 总胆汁酸出现明显升高。实验中，C组大鼠因肝衰竭大量死亡，存活的 部分大鼠在处死时临床症状有所好转。结合肝功能结果综合进行判断后 认为：C组大鼠的肝功能开始出现好转。 3．肠道菌群分析 3．1肠杆菌科细菌计数见表--4 表二 肠道肠杆科细菌定量分析 A组(n=10) B组(n=11) C组(n=10) 空肠(Igcfu／g肠段) 3．64-0．5(80％) 5．14-0 7(73％)” 4，3±0．9(80％)△ 回肠(19cfu／g肠段) 5 34-1．0(90％) 6．9±1 4(100％)”6．34-1 5(90％) 结肠内容物(1