鸡类胰岛素生长因子-I基因单碱基突变对该基因转录、表达以及对生长、屠体性状的影响-动物遗传育种与繁殖专业论文.docxVIP

摘 摘 要 鸡类胰岛素生长因子一I(iGF．I)对生物体的生发育具有重要的调控作用，直接发挥生长激 素的促生长发育功能。前人的研究结果表明：在鸡的l号染色体长臂近着丝粒附近存在一个影响 青年鸡体重的数量性状座位(QTL)，IGF-I基因处于该区域内。我们认为IGF-I基因是产生这种 QTL效应的主要因素。 通过对丝羽乌骨鸡和肉鸡IGF．1基因的部分碱基序列测定，发现在其5’端调控区存在一处单 碱基突变：c—A。肉鸡中大部分都是突变型(A)，而丝羽乌骨鸡则全部是野生型(c)。在丝羽 乌骨鸡和肉鸡杂交产生的F2代群体中进行基因型鉴定，扩大样本量。最后的统计分析结果显示： 该突变位点与一些生长、屠体性状相关显著。对生长速度有显著影响。 该突变位于IGF．I基因的启动子区域，距转录启始位点和“TATA”盒较近，而且该隧段在几 个物种申高度保守。转录因子结合位点预测分析结果表明；突变导致基因5’端启动子区域增加一- 个转录因子CdxA与之结台。CdxA是鸡体内特异表达的同源异形盒基因，其对消化器官，尤其 是肠发育有很重要的调节作用。纯化的外源表达的融合蛋白GST--CdxA与突变和非突变寡核苷 酸序列相互作用的电泳迁移率变动实验(EMSA)体外证明了突变确实增加了转录因子CdxA与 其结合。相关文献报道：转录因子cDxA能够使报告基因的转录水平显著增加。因此，突变型个 体IGF-I基因的转录、表达水平也要比非突变个体的水平显著增加。由于转录因子CdxA在鸡出 生后仅在肠上皮细胞中表达，虽然IGF-1基因在肝脏及其全身多种组织、器官表达，但除了肠上 皮细胞外，其他组织、器官没有转录因子与IGF．I基因相结合，所以突变型个体仅在肠组织中]GF．I 基因的转录、表达水平上升，其它组织中则无变化。通过荧光实时定量PCR和放射性免疫实验 技术，我们检测了突变和非突变型个体IGF．I基因在肝脏、小肠中的转录、表达情况。在肝脏中， IGF-I基因的转录、表达水平无显著的基因型差异。在小肠中，突变型个体IGF．I基因的转录水平 在三周龄时比非突变型个体高出约1倍，表达水平高出约30％。6周龄和9周龄时转录、表达水 平设有显著豁差异。 IGF·I基因能促进人的小肠平滑肌细胞生长，我们的实验结裂证明IGF．I基因同样能促进鸡的 小肠平滑肌细胞生长。由于突变型个体肠组织中IGF一1 jj勺含量比非突变型个体高山约30％．冈此 其平滑肌细胞、整个肠组织生长、发育更快。最后导致小肠长度比非突变型个体长约3％。小肠 是重要的消化、吸收器官，由于突变型个体的消化、吸收面积增大，使其在同样的条件下获得更 多的营养成份，因而其生长速度加快．获得了较高的体重和其它一些屠体性状均值。 在畜禽中，长期对生长速度进行人工选择，可以导致该品种(系)消化器官相对比例的上升， 使其消化、吸收能力增强，我们的实验结果验证了这种观点，同时也可以作为解释肉鸡为什么具 有很高生长速度的多个因素之一。可以应用于将来的分子育种T作中。数量性状座位(QTL)是基 闪组上的～段区域，含有一个或几个影响数量性状的基因。某一数量性状一般受多个基因以及环 境因素的影响，每个基因对该性状的影响程度相对较小，加上环境因素的作用，寻找、证明QTL 基因比较困难。但近年随着～些新的技术手段、统计分析工具的发展以及对基因组的更深入的研 究、理解，寻找、证明QTL基因已经不像以前那样困难了。很多与人类遗传疾病以及崮噙生产 究、理解，寻找、证明QTL基因已经不像以前那样困难了。很多与人类遗传疾病以及崮噙生产 性状的QTL基因陆续被发现a我们的结果表明，鸡IGF—I基因的碱基突变是产生这种QTL效应 的因素。在畜禽中发现QTL基因能够对人类相关基因的发现、研究提供重要的借鉴、指导意义。 关键词：鸡，IGF-I基因，突变，转录与表达，QTL AbstractA Abstract A QTL affecting body weight of young chickens was mapped to the short arm of chromosome I the centromere using F2 population crossing of broiler sire—line and egg-lying line previously． Searching for genes putative genes in this region，we found that the insulin—like growth factor-I gene is the strongest candidate gene for this effect base its crucial role in growth and devel