课件：临床微生物学与检验.pptVIP

2．非β溶血链球菌鉴定 通过血清学测定抗原群，可将B群链球菌、非β溶血的菌株和肺炎链球菌得以鉴定 Lancefield的D群抗原可以存在于牛链球菌、肠球菌属和片球菌属，因此需要进行生化反应予以鉴别。 菌 种 optochin敏感试验 胆汁溶菌试验 胆汁七叶苷试验 肺炎链球菌 S + — 草绿色链球菌 R — — 牛链球菌 R — + 草绿色链球菌鉴定 草绿色链球菌是人体正常菌群一部分，通常不致病，目前借助于常规方法鉴定到种有一定困难，通常将其鉴定到群。 根据16SrRNA可分为温和链球菌群（mitis group）、米勒链球菌群（miller group）、变异链球菌群（mutans group）和唾液链球菌群（salivrius group） 菌 群 VP 脲酶 精氨酸 七叶苷 甘露醇 山梨醇 温和链球菌群 － － － － － － 变异链球菌群 ＋ － － ＋ ＋ ＋ 唾液链球菌群 ＋/— ＋/— － ＋ － － 米勒链球菌群 ＋ － ＋ ＋/－ ＋/― ― 商品化鉴定系统 API-Strep系统 ID32 strep系统 Microscan系统 抗链球菌溶素O抗体检测 常用于风湿热的辅助诊断 活动性风湿热患者抗体效价一般超过400单位 肠球菌属Enterococus 广泛分布在自然界 常栖居在人、动物的肠道和女性生殖道 为医院感染的重要病原菌 一、分类 肠球菌属原归类于链球菌属 于1984年将其命名为肠球菌属 至今，经由16SrRNA序列分析和核酸杂交 等，证实肠球菌可分为5群19个种 临床标本分离的肠球菌多属于第2群 二、临床意义 肠球菌所致感染最多见于泌尿道感染,是重要的医院感染病原菌 多与泌尿道器械操作、留置导尿、尿路结构异常有关 腹腔和盆腔创伤时也是常见的感染菌 肠球菌引起的菌血症常发生于有严重基础疾患的老年人、长期住院接受抗菌药物治疗的免疫功能低下患者 二、临床意义 近年来不断上升的肠球菌感染率和广泛使用 抗菌药物出现的耐药性有关 在临床诊断前应认真评估分离菌的临床意义 临床标本中分离的80%~90%是粪肠球菌 屎肠球菌约占5%~10% 很少分离到肠球菌属的其它种 三、生物学特性 形态： 肠球菌为革兰阳性球菌、呈单个，成对或短链状排列，琼脂平板上生长的细菌呈球杆状 液体培养基中呈卵圆形、链状排列 无芽胞和荚膜，个别菌种有稀疏鞭毛 培养特性 兼性厌氧，最适生长温度35℃，10℃和45℃均能生长 营养要求不高。部分粪肠球菌菌株在含有兔血、马血或人血的平板上出现β溶血，而在羊血平板上不出现。其它菌种出现α溶血或不溶血 所有菌株在含6.5%NaCl肉汤中能生长 生物学特性 在40%胆汁培养基中能分解七叶苷，多数菌种具有吡咯烷酮芳基酰胺酶，能水解吡咯烷酮-β-萘基酰胺（PYR） 不含细胞色素氧化酶和触酶 但粪肠球菌培养于含血的培养基中，可合成细胞色素或触酶或两者皆有，因而某些菌株表现为触酶弱阳性 含链球菌D群抗原。G+Cmol%为37~45 抵抗力 对头孢菌素类、林可霉素类和磺胺类抗菌药物耐药 近年来获得性耐药菌株不断增多，表现为对氨基糖苷类耐药和对万古霉素耐药。对万古霉素的耐药是由van A、van B和van C等基因介导 四、微生物检验 （一）检验程序  （二）标本采集 常规方法采集血、尿、创伤标本和其他拭子， 标本于1小时内接种完毕。 （三）标本直接检查 涂片染色显微镜检查可见单个、成双或短链 排列卵圆形革兰阳性球菌 （四）分离培养与鉴定 标本接种于含血琼脂平板 若送检标本中含革兰阴性杆菌可选用选择鉴别培养基，常用的有： 叠氮胆汁七叶苷琼脂，可抑制革兰阴性菌生长，而肠球菌分解七叶苷产生黑色菌落； 哥伦比亚多粘菌素-萘啶酸琼脂(CAN)和苯乙基乙醇琼脂(PEA) 由于耐万古霉素肠球菌发生率增高，为早期检出耐 药菌株，可使用含万古霉素琼脂筛选方法（详见第 三十五章） 细菌鉴定方法如下 菌属的鉴定 肠球菌属细菌革兰染色阳性，卵圆形，单个、成双或短链排列。 触酶阴性、胆汁七叶苷和PYR阳性、6.5% NaCl肉汤中能生长 菌属 万古霉素 分解葡萄糖产气 PYR 胆汁七叶苷 6.5%NaCl 生长温度 10℃ 45℃ 肠球菌属 敏感 － ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ 乳球菌属 敏感 － ＋ ＋ V ＋ V 链球菌属 敏感 ― ―a ― ― ― V 明串珠菌属 耐药 ＋ － Vb V ＋ V 肠球菌属间的菌种鉴定 根据对甘露醇，山梨醇和精氨酸的代谢分五群 第一群:分解甘露醇、山梨糖产酸，不水解精氨酸 第二群:分解甘露醇和水解精氨酸 第三群:水解精氨酸，不分解甘露醇、山梨醇和山梨糖 第四群:不分解甘露醇，山梨糖，不水解精氨酸 第五群:分解甘露醇不分解山梨糖