《基因工程》全面第一轮复习.pptVIP

专题一 基因工程 一、工具 与 工具酶 二、分子手术刀—— 限制性内切酶 DNA连接酶的DNA聚合酶区别？ 相同点——作用位点都在磷酸二酯键 四 分子运输车—— 基因进入受体细胞的载体 基因工程 之 第2节 基 本 操 作 程 序 基因工程的步骤： 步骤一 获取目的基因 一. 获取目的基因的工具: 步骤二 构建表达载体 步骤三 导入受体细胞 植物 步骤四 目的基因的检测与鉴定 检 测 步 骤 动植物基因工程的成果 第3节 基因工程的应用 体外基因治疗 获取某种细胞 （二）基因工程与农牧业、食品业 第４节　　　　 蛋白质工程的掘起 １．蛋白质工程 目的 与 实质： 2、蛋白质工程的原理 从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列。 依据＿＿＿＿＿＿＿＿原理 标记基因 常以 抗生素抗性基因 作为标记基因 1 农杆菌转化法导入植物细胞 2 显微注射技术导入动物细胞 只能导入动物的______或_______,不能导入________内 3 感受态细胞法导入微生物细胞 原核生物的特点: 半乳糖血症 半乳糖 乳腺生物反应器 过程 不能把一种生物的所有DNA直接导入受体细胞? 若DNA没经过载体的构建,直接把所有DNA导入受体细胞(植物,动物), 则不知道什么基因能真正进入受体内 此方法针对性差,效果差! 高度分化的体细胞的_________受到限制 从而,不能表现出细胞全能性 基因 DNA 氨基酸序列 多肽链 蛋白质 三维结构 预期功能 生物功能 mRNA 转录 翻译 折叠 DNA合成 分子设计 3、蛋白质工程流程图： 因此，要对蛋白质的结构进行设计改造，使之符合人们对蛋白质的特定需求，最终还必须通过基因来完成。 （蛋白质工程的原理应该是中心法则的逆推。） 预期蛋白质功能 设计____________ 结构 推测应有的________序列 表达基因，合成新型蛋白质 找到相应的____序列（基因） 例：抗四环素基因， 氨苄青霉素抗性基因 在对四环素无抗性的大肠杆菌导入抗四环素基因，再置于含四环素的培养基中培养。 对四环素无抗性 置于四环素中 含抗四环素基因 置于四环素中 不死 说明： 抗四环素基因能成功表达， 细菌具有抗四环素的能力 返回课堂 载体(Ti质粒) 构建 ( ） _________感染植物__________ ( (目的基因转移到染色体的DNA中) 组织培养、形成新植株 转入（ ） 体细胞 农杆菌 的 特 点 易感染______植物和______植物 (不能感染________植物) Ti质粒的T-DNA 可转移植物细胞内, 并整合到受体细胞的染色体DNA 双子叶 祼子叶 单子叶 过程 目的基因 目的基因+Ti质粒 农杆菌 农杆菌 返回目录 返回目录 解释 高度分化的体细胞的_________受到限制 从而,不能表现出细胞全能性 细胞全能性 卵细胞 受精卵 体细胞 用口径为1μm的DNA注射器，将大量的目的基因片段注入到受精卵的核内，然后把经过注射的受精卵移植到另一只雌性动物的子宫内，使受精卵发育为转基因动物。 返回目录 感受态细胞 用Ca2+处理原核细胞 已构建好的表达载体 缓冲液 适宜温度 感受态细胞吸收DNA分子 过程: 繁殖快, 多为单细胞,遗传物质少 半乳糖转移酶 半乳糖转移,利用 血液中的半乳糖下降 正常 半乳糖 半乳糖转移酶 半乳糖转移,利用 血液中的半乳糖下降 缺失半乳糖转移酶基因 血液中的半乳糖过高 肝、脑受损 基因治疗例子 —— 治疗 如何治疗？ 有半乳糖苷转移酶基因 噬菌体 （患者的）离体组织细胞 能够利用半乳糖 这表明， 用基因治疗的方法来治疗此遗传病是可能的 半乳糖血症 基因治疗例子 —— 治疗 基因治疗仍处于临床试验阶段 返回目录 回目录 获取目的基因 构建_________ 导入________________ 显微注射技术 早期胚胎发育 胚胎移植到母体动物子宫内 雌性个体 ,分泌乳汁 获取蛋白质 哺乳动物,受精卵 所以一定要构建基因载体!! 思考 返回课堂 * * 一、 基本工具 二、 操作程序 三、 应用 四、 蛋白质工程 专题一 基因工程 基因工程 基因拼接技术 DNA重组技术 = = 基因工程含义: (1)按照人们意愿, ____改造生物遗传特性的技术 (2)在__________水平进行操作 (3)是在