微生物的生态与环境保护.ppt

前言 第一节 微生物在自然界中的分布 第二节 微生物与环境间的关系 第三节 微生物与自然物质循环 第四节 微生物与环境保护;前 言;几个概念;第一节 微生物在自然界中的分布; 同一土体由于微环境的通气、水分、营养等状况都存在着差异，致使不同微生物呈立体分布。 每克肥土中通常含有几亿至几十亿个微生物，贫瘠土壤每克也有几百万至几千万个微生物。 （1）细菌数量：70~90%；种类：主要为腐生，少数自养 分布：表层最多，随土层加深减少，厌氧菌反之。 （2）放线菌数量：5~30% （3）真菌 （4）藻类 （5）原生动物;农田土壤上层15cm处微生物数量和生物量;;1、取土样 选定取样点，按对角交叉（五点法）取样。先除去表层约2cm的土壤，将铲子插入土中数次，然后取2-10cm处的土壤。盛土的容器应是无菌的。将5点样品约1kg充分混匀，除去碎石、植物残根等。土样取回后应尽快投入实验，同时取10-15g，称重后经105℃烘干8h，置于干燥器中冷却后再次称重，计算含水量。;2、倒平板 熔化已灭菌的四种培养基(细菌、霉菌、酵母菌、放线菌四大类 )并冷却至45℃左右倒平板，凝固待用，每种培养基每个稀释度各三只平板。;3、编号 取5支无菌空试管（15×150mm）依次编号为10-3、10-4、10-5、10-6、10-7。 4、分装无菌水 按无菌操作用5mL移液管分别吸取4.5mL无菌水于编号的各无菌空试管中。;5. 制备土壤稀释液 称土样1g于盛有99mL无菌水或无菌生理盐水并装有玻璃珠的三角瓶中，振荡10-20min，使土样中的菌体、芽孢或孢子均匀分散，此即为10-2浓度的菌悬液。用无菌移液管吸取悬液0.5mL于4.5mL无菌水试管中，用移液管吹吸三次、摇匀，此即为10-3浓度。同样方法，依次稀释到10-7。稀释过程需在无菌室或无菌操作条件下进行，整个稀释过程如图。;;6、混菌法接种 细菌分离分别精确吸取10-7，10-6，10-5三个稀释度的菌液1mL；放线菌分离分别吸取10-5，10-4，10-3三个稀释度的菌液1mL；霉菌分离分别吸取10-4，10-3，10-2三个稀释度的菌液1mL；酵母菌分离分别吸取10-6，10-5，10-4三个稀释度的菌液1mL，对号加在已凝固的平板上，同时做空白对照，空白对照只加培养基，不接种菌液。 7. 培养 将涂布后的平板上倒置于恒温箱中，细菌在37℃下培养24-48h，霉菌在28℃下培养3-5d，放线菌在28℃下培养5-7d，酵母菌30℃下培养2-3d,观察结果。;;二、微生物在水中的分布 　　 ★ 水体中微生物的来源 土壤、空气、动植物尸体、人和动物的排泻物、工业及生活污水。 ★ 种类　 水中存在的微生物90%为革兰氏阴性菌，主要有弧菌、假单胞菌、黄杆菌等。鞘细菌及有柄附生细菌也常见于水体中。 ★ 微生物在水体中的分布 水域中微生物的种类和数量与水域的有机物、无机物的种类和含量，光照、酸碱度、渗透压、温度、含氧量和有毒物质的含量有密切关系。;★ 各种水系;清水型水生微生物;环境：大量的人畜排泄物、生活污物和工业废水等，有 机物含量大增 微生物数量和类群： 数量：大量外来的腐生细菌，使腐败型水生微生物尤其是细菌和原生动物大量繁殖，每毫升达到107-108个。 类群：G-无芽孢杆菌，如E. coli, Bacillus、Vibrio和Spirillum等的一些种,纤毛虫类、鞭毛虫类和根足虫类等原生动物,动植物致病菌。 繁殖及后果：因水环境中的营养等条件不能满足其生长繁殖的要求，加上周围其它微生物的竞争和拮抗关系，一般难以长期生存，但水体的流动，会造成病原菌的传播。;海水型水生微生物;★ 水的净化作用;★ 饮用水的微生物学标准;① 样品的处理和稀释 ;●环境要求：琼脂平板在工作台暴露15分钟，每个平板不得超过15个菌落。 ●代表性：取固体样品时需多采几个部位，且经过均质或研磨；液体样品须经过振摇，以获得均匀稀释液。 ●减少误差：每递增稀释一次即换用1支1ml灭菌吸管，将吸管内液体沿管壁流入，勿使吸管尖端伸入稀释液内，并且稀释液应充分振摇。;② 稀释样品的取样和倾注平皿 ;③培养及计数;注意： ●当平板上有链状菌落生长时，如呈链状生长的菌落之间 无任何明显界限，则应作为一个菌落计，如存在有几条 不同来源的链，则每条链均应按一个菌落计算，不要把 链上生长的每一个菌落分开计数。 ●如有片状菌落生长，该平板一般不宜采用，如片状菌落 不到平板一半，而另一半又分布均匀，则可以半个平板 的菌