分子克隆工具酶限制和修饰.pptVIP

分子克隆工具酶 ——限制和修饰(restriction and modifying ) 周口师范学院生命科学系 进行基因工程操作，首先要获得需要重组和能够重组的DNA片段。（如何获得？） 用相应的酶进行切割，就可以获得含有完整基因片段、复制起始位点、转录启动子或转录区等具有特定功能的DNA片段。 那么，如何将需要的DNA片段切割和连接呢？ 1 限制酶的发现 20世纪30年代初发现噬菌体在不同菌株之间的限制现象与不受限制现象， 60年代提出对上述现象解释的假设: 内切酶能识别并切断外源DNA的某些位点使其失活而限制外来噬菌体的繁殖，属限制酶类 。 说明： K菌株和B菌株中有一种限制系统，可以排除外来的DNA。 C菌株不能限制来自K菌株和B菌株的DNA。 这种限制作用就是限制酶降解外源DNA，维护宿主遗传稳定的保护机制。 限制酶的功能： 降解外源DNA，从而阻止其复制和整合到宿主细胞中。 修饰酶的功能： 对自身某个碱基进行甲基化，从而保护自身的DNA不被降解。 核酸酶：通过切割相邻的两个核苷酸之间的磷酸二酯键，从而导致核酸分子多核苷酸链发生水解断裂的酶。 核酸内切酶