课件：第章外源化学物的一般毒性作用.ppt

4.1.1 亚慢性、慢性毒性作用的概念 亚慢性毒性作用指试验动物连续多日接触较大剂量的外来化学物所出现的中毒效应。 连续多日约相当于受试动物寿命的1/30-1/10。一般环境毒理学和食品毒理学要求连续接触3-6个月，工业毒理学要求3个月。呼吸道接触主张30-90天试验，每天6小时，每周5天；皮肤接触试验为30天。 较大剂量上限应小于急毒试验的LD50 。 慢性毒性作用指以低剂量外来化学物长期给予试验动物接触，其对试验动物产生的毒性效应。 4.1.2 亚慢性毒性作用的试验目的 目的主要是为慢毒试验提供设计依据： 探讨试验动物长期接触外来化学物可引起有害效应的剂量，以估计该化学物慢性接触的危险性，为进一步进行慢毒试验提供接触剂量的设计范围； 探讨亚慢性毒性的阈剂量/浓度，确定对动物的毒作用性质、发生毒效应的类型和靶器官，并初步确定最大无作用量，从而确定慢性毒性作用的观察指标； 根据亚慢性毒性的阈剂量和无作用量，估计慢性接触的危险性，为接触该化学物的安全限量标准提供初步依据，以确定是否需进一步进行慢毒试验； 了解受试物对动物繁殖及对子代的致畸作用，为评价受试物能否应用于食品提供依据。 4.1.3 慢性毒性作用的试验目的 慢毒试验是外来化学物一般毒性评价程序中最后阶段的观察，其目的是为了评价动物长期接触某受试物后可能出现的毒性作用，尤其是进行性或不可逆的毒性作用以及致癌作用，以确定外来化学物的毒性下限，即长期接触该化学物可以引起机体危害的阈剂量和最大无作用量，为最终评价受试物能否应用于食品提供依据，为进行该受试物的危险评价与制定人接触该物质的安全限量提供毒理学依据，如最高允许浓度和每日允许摄入量等。 4.2 亚慢性毒性试验设计 4.2.1 试验动物的选择 4.2.2 试验动物的喂养环境 4.2.3 剂量的选择与分组 4.2.4 染毒途径 4.2.5 试验周期 4.2.6 观察指标 4.2.1 试验动物的选择 原则上要求对受试物代谢过程基本与人类相似,应当是急性毒性试验已证明的对受试物敏感的种属和品系,同时还应考虑与慢性毒作用试验中预计使用的动物种属和品系相同。若无法掌握这一情况，则应有两种实验动物，一种为啮齿类，另一为非啮齿类，以便了解受试物毒性特征。也应参考观察指标的需要而选择，如需多次抽血检查则不宜用小鼠。 性别选择一般雌雄兼用，特殊试验可选用单性别动物。如对性腺影响试验。 年龄选择大鼠4周，重50克；小鼠3周，重10克。 4.2.2 试验动物的喂养环境 在亚慢性试验期间，动物饲养条件及环境可能影响毒性效应，应注意营养平衡和环境的稳定，必须有营养合理的饲料、充足干净的饮水和清洁的生活环境。并保持适宜的温度和湿度，以保证动物健康。 当受试验物在饲料中的比例较高（大于5%）时，须考虑其可食性及营养平衡问题，还要避免经胃肠代谢后的毒物又被动物摄取而影响试验结果。 不同物种的动物应分室饲养，笼具要保证实验动物可自由活动，必要时单笼饲养，且应有人工昼夜设施。 4.2.3 剂量的选择与分组 所选剂量上限应在试验期不引起动物死亡或个别死亡，但要有明显的中毒效应或靶器官出现明显损伤。可参考急毒试验的阈剂量为其上限，也可用1/20-1/5LD50。 亚慢性试验应求量-效关系，因此至少设置3-4个剂量组、1个正常对照组，必要时加1个溶剂对照组。 每组动物大鼠20-40只、家兔10-20只、狗6-8只、猴2-4只，若试验中期需处死部分动物作病理解剖检查时应相应增加动物例数。 4.2.4 染毒途径 染毒途径先要尽量模拟人类在环境中接触该受试物的途径和方式，其次应与后来预期要进行的慢毒试验的接触途径一致。 经口接触一般采用饲喂法。但应注意动物厌食或拒食。 经呼吸道吸入接触的时间随所接触受试物而定，如为工业毒物可接触1-4小时，环境污染则可适当延长至4-8小时。 每日接触受试物应定时，以减小接触量和反应误差。 4.2.5 试验周期 试验周期一般占实验动物寿命的1/10。因为不同动物的寿命不同导致实验周期有所不同，从几个月至1年不等。 一般对长周期、经常接触的受试物可选择90天试验周期，而对阶段性接触的受试物可选择30天。 4.2.6 观察指标 亚慢性试验中观察指标比较广泛，其选择十分重要。常根据急性、蓄积性试验提供的线索及相关资料，选择一些特异和非特异指标，包括一般性指标、血液和行为学检查、生理生化指标、病理解剖学与病理组织学检查及器官系数测定等。 4.2.6.1 一般指标 4.2.6.2 病理学检查 4.2.6.3 特异指标 4.2.6.1 一般指标 为非特异指标，是外来化学物对机体毒性作用的综合性总体反映。主要包括： 动物体重：反映化学物对消化系统和代谢的影响。 食物利用率：摄食量与体重的增长比率。同样反映化学物对消化系统和代谢的影响。 症状：主要有毛色