分子生物学--DNA的重组与转座幻灯片.pptVIP

Figure Both strands of Tn10 are cleaved sequentially, and then the transposon is joined to the nicked target site. Nonreplicative transposition proceeds by breakage and reunion . （三）转座子转座频率的控制 对于细胞来说，控制转座子调换的频率是很重要的，为了自下而上，转座子必须能维持某一最小的移动频率，但是太大的频率会破坏宿主细胞，每一个转座子好像都有控制它自身调换频率的机制，机制的多样性通过Tn10被描写。 Tn10为复合型转座子，两端各有一重复序列 5`NGCTAGCN3` 3`NCGATCGN5` IS10R是Tn10的活性组件，IS10L是功能缺陷型，其转座酶的活力是IS10R的1-10%，靠近IS10R有两个方向相反的启动子。 1、 甲基化控制：Tn10上有二个甲基化位点（GATC），一个位于IS上，另一个位于转座子的转座酶启动子上。Tn10与宿主DNA 一起复制时，产生半甲基化，转座子激活，编码出转座酶，导致转座，一旦两个位点均被甲基化，则转座酶停止合成，转座停止。 GATC GATC 2、 通过启动子调节：Tn10上有二个方向相反的启动子，向外的启动子较强，称Pout，转录产物为一短链RNA，向内的启动子Pin较弱，转录产物为一个有编码区段的RNA，可翻译出47KD的转座酶，两种转录产物RNA之间有40bp的重叠，可结合从而抑制转座酶的表达。 . （四）转座子引起的某些遗传学效应 引起插入突变 插入位置上出现新的基因 插入位置出现靶DNA的少数核苷酸对重复 导致染色体畸变 切除，转座子从原来的位点上消失。 真核生物的转座作用 较清楚的是果蝇的P成分，玉米的Ac-Ds元件1 玉米的转座成分玉米中存在几组控制元件：Ac-Ds，spm， Dt等，不同品系中其数目和位置不同。较清楚的是Ac-Ds元件，其中Ac是自主成分，Ds是非自主成分。Ac是一个 Figure The Ac element has two open reading frames; Ds elements have internal deletions. Controlling elements in maize form families of transposons 完整的转座子，长4563bp，可转录出3600bp的mRNA，含807个密码子序列，在编码序列两侧有11bp的反向重复序列，Ac具有转座酶基因，可以自主移动，它能引起较高回复频率的突变，Ac突变可导致玉米合成花色素苷。 以上迁改数量均为施工图评审确定的数量，项目具体内容详见相关设计图纸。乙方需按批准施工图完成各杆线线路及设施安装、征地及青苗补偿、验收资料等工作。 第七章 DNA的重组与转座 7.1 同源重组 7.2 位点特异性重组 7.3 转座作用 7.4 逆转录转座子 广义上，任何造成基因型变化的基因交流过程都叫遗传重组（genetic recombination）. 狭义上，指涉及到DNA分子内断裂-复合的基因交流，有时又称交换（crossing over）. 通过不同个体间的基因交换，可以保证遗传的多样性，从而为选择奠定物质基础。 遗传重组包括同源重组，位点专一性重组，转座重组和异常重组。 7.1?同源重组(homologous recombination) 一、定义：同源重组也称交换，指减数分裂过程中染色体间遗传物质的交换，即在两个双螺旋DNA分子中任何一对同源序列作底物进行交换。 同源重组发生在DNA 的同源序列之间。在生物细胞中很普遍，如真核生物非姊妹染色体之间的交换，姊妹染色体的交换，细菌及其某些低等真核生物的转化、转导、接合等都属于同源重组。 同源重组的机制 （一）、断裂复合： 减数分裂中，染色体减数分裂和配对时，在染色单体水平上发生物理断裂，断裂可通过交叉重接而解除张力，从而产生两个相互重组的染色单体。 （二）重组过程:由Holliday提出，后经Messelson，Radding修改，可以分为以下几个步骤. 1、切断（nicking）：同源联会的两个DNA分子中任意一个出现单链切口（由某些DNA内切酶产生）。 2、链转换（strand displacement）：切口处形成5`端局部解链，由细胞内类似于大肠杆