分子生物学--蛋白质的生物合成幻灯片.pptVIP

多数由游离核糖体合成 翻译后运输（post-translational transport） 蛋白含有前导序列（leader sequences）与定位有关 进入线粒体和叶绿体前先解折叠, 进入后重新折叠, 需要分子伴侣 （三）线粒体、叶绿体蛋白的转运 蛋白质跨膜前需解折叠，跨膜后重新折叠成熟的构型 前导序列(Leader sequences) 碱性aa丰富 基本上不含酸性aa 羟基aa含量较高 前导序列介导翻译后的跨膜转运 酵母细胞色素C 氧化酶IV 亚单位的前导序列 开头的12 个氨基酸足以将多肽链导入线粒体的基质中去。 肽链的终止和释放 1.终止信号的识别：有三种蛋白因子 RF1识别UAA、UAG， RF2识别UAA、UGA。 RF3协助肽链释放。 2. 肽链释放：释放因子使肽酰转移酶活性转变为水解活性，并释放tRNA，然后核糖体离开。 1. 核糖体：更大，80S，可解离成60S和40S。 2. 起始tRNA： （三）真核生物蛋白质合成的过程 二种携带Met的tRNA： 起始tRNA : 用于肽链内部的tRNAMet。 即tRNAiMet，携带 Met后，并不甲酰化。 3.起始密码子： AUG，上游无SD序列，通常mRNA上最靠近5’端的AUG为起始部位。 40S核糖体与mRNA 5’端帽子结合，向3’方向移动，搜索AUG密码子，这过程要消耗ATP。 命名为eIF-n eIF-3：与40S亚基结合，使大小亚基解离； eIF-2：与Met-tRNAiMet及GTP结合； eIF-4：与mRNA的帽子结合。 eIF-5：释放起始因子，使核糖体亚基结合 4.起始因子 1. 80S核糖体解离 40S 60S 60S 6 2.形成Met- tRNAiMet.eIF-2.GTP三元复合物 Met + elF-2 GTP Met- tRNAiMet Met- tRNAiMet.eIF-2.GTP 40S 3 1 4C 真核生物mRNA翻译的起始 3.形成40S前起始复合物 40S 3 1 4C + Met Met- tRNAiMet.eIF-2.GTP 40S 3 1 4C Met 4. 40S前起始复合物结合mRNA mRNA + 40S 3 1 4C Met 复合物对mRNA进行滑动搜索，寻找起始密码子AUG 40S 3 1 4C Met 40S 3 1 4C Met AUG 5.生成80S起始复合物 eIF-5 40S Met AUG 60S 各种elF释放 GDP+Pi Met met 40S 60S Met 40S 60S mRNA eIF-3、6、1、4C ① ② ATP ADP+Pi ③ Met elF-2 -GTP - Met-tRNAiMet 搜索AUG Met AUG GDP+Pi 各种elF释放 elF-5 ④ Met 真核生物翻译起始复合物形成过程 原核生物和真核生物翻译起始的比较 原核：mRNA先与小亚基结合，再有起始tRNA加入 真核：起始tRNA先结合小亚基，然后在多种因子参与下结合mRNA 原核：依靠小亚基内16S rRNA 3’端序列与SD序列互补、结合来定位于mRNA 真核：mRNA依靠5’帽子的结合因子结合小亚基，然后以搜索机制寻找起始AUG 5．延伸因子和终止因子： 原核延伸因子 生物功能 真核延伸因子 EF-Tu 促进氨酰-tRNA进入A位，分解GTP EF-Ts 调节亚基 eEF-1 EFG 促进移位 eEF-2 真核生物中多肽终止因子称为信号释放因子(signal release factor) 写成eRF 蛋白质合成总结 起始密码子 Met-tRNAiMet eIF-n 至少9种 GTP, ATP 起始密码子，SD序列 fMet-tRNAf IF-1,IF-2,IF-3 GTP 肽链起始 氨酰-tRNA合成酶，ATP 氨酰-tRNA合成酶，ATP aa的活化 真核生物所需因子 原核生物所需因子 过程 终止密码子 eRF GTP 终止密码子 RF-1, RF-2, RF-3 GTP 肽链的终止 和释放 eEF-1，GTP 肽酰转移酶 eEF-2，GTP EF-Tu, EFTs,GTP 肽酰转移酶 EF-G，GTP 肽链的延长 进位 成键 位移 蛋白质合成总结 真核生物所需因子 原核生物所需因子 过程 三、蛋白质的运输和翻译后修饰 （一）概述 高尔基体 溶酶体 细胞膜 分泌到胞外 内质网 翻译后转运 （游离核糖体） 共翻译转运 (内质网结合 的核糖体) 胞浆 细胞核 线粒体、叶绿体 过氧化酶体 What determine proteins’ fates ? Signals