环境因子对番茄ACC合成酶基因LE-ACS6启动子功能的影响-生物化学及分子生物学专业论文.docxVIP

南开大学硕士研究生论文 南开大学硕士研究生论文 生化及分子生物学 摘 要 乙烯在植物从种子萌发至衰老的整个发商过程中，起着重要的调节作用。这些 调节机制与植物对外界刺激如：伤害、害虫侵袭、水涝而产生的应答机制是密切相 关的■ 乙烯是从SAM到ACC至乙烯，在该合成过程中，关键酶是ACC合成酶。其中ACC 合成酶是有多基因家族编码的【”J。已有报道，ACC合成酶受到众多的因子如：虫害、 生长索、伤害、和植物发育的影响。 在该部分工作中，我们将LE—ACS6的片段用电脑程序与Database中的序列进行 比较，发现其存在一些假定的顺式作用元件，在这些顺式元件中，发现有与生长素 及其它因子应答有关的顺式作用元件。另外，各种刺激因子如：伤害、光照、温度 胁迫等对ACC合成酶基因的凋节存不同植物材料中各有报道。 因此，我们利用前期工作所得的LE—ACS6：：GUS转基因植物做了这些刺激因子对 番茄LE—ACS6启动子活性的影响。 我们用植物激素类物质如：生长素、赤霉素、脱落酸、三碘苯甲酸等处理转基 因的拟南芥菜和番茄的叶片及幼苗，对样品进行GUS分析，发现生长类物质能够促 进LE—ACS6启动子的表达，而生长素类物质的抑制剂，则能够减弱LE—ACS6的表达。 另外，乙烯也能够抑制LE-ACS6的表达。 同时，我们还研究了诱导物、光照、伤害、低温对LE-ACS6：：BUS转基因植物中 LE—ACS6的影响。诱导物、伤害、低温能够促进I。E—ACS6在转基因植物中的表达。 光照对番茄幼苗LE—ACS6启动子的促进作用较明鼹，但对果实中f上ACS6的促进作 用较弱。 通过各种环境因子对LE—ACS6：：GUS转基因植物中LE-ACS6启动子的影响，为我 们在分子水平上进一步研究LE—ACS6在乙烯合成途径中的作用和调控机制提供了基 础。 关键词： 伤害， 乙烯，生长素， 顺式作用元件，诱导物 堕墅查堂堡主翌塞竺堕苎 堕墅查堂堡主翌塞竺堕苎 ．尘垡丝尘!兰：!!羔 ABSTRACT Ethylene i 8 in involved in the regulation of plant development processes from seed germi nation to senescence．It 1 s also close]y associated with the responses to many environmental stimuli such as touch，wounding，pathogen attack and fEooding[”． Ethylene is biosynthesized from SAM via ACC．The rate limiting steps in the production of ethylene iS the convers J on of SAM tO ACC．This step i S catalyzed by ACC synthase，which is encoded as a multigene family咀These genes of ACC synthase have been cloned from various species and their expression patterns have been studied．Several reports have shown that the different ACC synthase isogenes are expressed in response to pathogen， infection，auxin，wounding，and plant development． Here，we compare the sequence of LE ACS6 with Database through computer． We find that some putative cls-elements which is assoeiated wi th auxin and other responses of stimu]i．Additionally，some paper reports that other factors such as：light，stress，wounding，temperature，alSO influence the expressi