黄淮海大豆冀豆17和冀nf58的遗传基础分析及重要蛋白挖掘-微生物学专业毕业论文.docxVIP

中图分类号：Q93密级：公开UDC：579学校代码：10094讶业岔解侧誊二I印 ’r●- 乒D 尢 h事 硕士学位论文 (学历硕士)黄淮海大豆冀豆1 7和冀nf58的遗传基础分析及重要蛋白挖掘Genetic Basis Analysis and the Identification of Key Proteins of Huang-huai—hai Soybean Cultivars Jidoul7 and Ji nf58作者姓名：王静华 指导教师：赵宝华教授秦君研究员 学科专业：微生物学 研究方向：分子细菌学 论文开题日期：2013年3月4日万方数据哪㈣ lⅧ㈣川籼IIIIl洲IY2789307一学位论文原创性声明本人所提交的学位论文《黄淮海大豆冀豆17和冀nf58的遗传基础分析及重要蛋白 挖掘》，是在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的原创性成果。除文中已经注明 引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本 文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中标明。本声明的法律后果由本人承担。论文作者(签名)：j搿车指导教师确认(签名)：矽陟年岁月砖佃仞佐年上月步扫学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解河北师范大学有权保留并向国家有关部门或机构送交学 位论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权河北师范大学可以将学位论 文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其它复制手段保 存、汇编学位论文。(保密的学位论文在——年解密后适用本授权书)论文作者(签名)：互耨卑指 导k训侈年岁月步日仂 教岱 节年 签土 名月 )， 谢h 办∥弋II万方数据摘要大豆(Glycine max(L-)Merr．)作为重要的粮食和油料作物，不仅含有丰富的蛋白 质和脂肪，还含有许多如异黄酮、低聚糖等非常有益于人类健康的营养物质。近年来我 国大豆进口量逐年增加，自给不足，而解决的最好办法就是提高大豆产量，因此应选育 更多的高产优质品种来满足市场的需求。姊妹品种冀豆17和冀nf58是Hobbit与早5241 通过有性杂交系谱选育而成的优良骨干品种。本研究从表型性状、生理、分子标记及蛋白产物等多方面分析了冀豆17、冀nf58及其双亲Hobbit和早5241的遗传基础，并比较了冀豆17和冀nf58与双亲的差异，研究结果对选育优良品种具有重要的指导意义。本实验利用408对SSR标记对冀豆17、冀nf58及其双亲Hobbit和早5241进行遗 传基础解析。结果表明，Hobbit和早5241对冀豆17的遗传贡献率分别为79．3％和20．7％， 对冀nf58的遗传贡献率分别为58．9％和41．1％，说明了母本Hobbit对冀豆17和冀nf58 的遗传贡献率高于父本早5241。获取连续两年4个品种的农艺性状(包括株高、分枝数、 主茎节数、单株粒数、单株粒重、百粒重)和生理指标(光合速率、叶绿素含量、可溶 性蛋白含量、可溶性糖含量)，研究结果表明，冀豆17和冀nf58在农艺性状和生理方 面，与双亲相比存在优势。进一步对4个品种进行了大豆花叶病毒SC3的抗性鉴定，结 果表明，冀豆17和冀nf58及双亲均对SC3表现出抗性，并且SC3对这4个品种的单株 粒重、株高和单株粒数均无显著影响，遗传了双亲的优良性状。利用iTRAQ方法鉴定出冀豆17与母本Hobbit，父本早5241在2周叶片表达的蛋 白1269个。通过冀豆17与双亲间蛋白表达差异分析，从中挑选出光合通路上的3个蛋 白与原初反应相关的叶绿素A／B结合蛋白1(CABl)、与电子传递相关的放氧增强蛋白 (OEEl)、景天庚酮糖一1，7．二磷酸酶(SBPase)和荣莉酸合成途径中的蛋白脂氧合酶(LOX)，并制备了抗体。用蛋白印迹技术检测这些抗体在姊妹品种冀豆17和冀nf58与双亲的2周、4周、6周、8周叶(从出苗后)和2周、3周、4周荚(从开花后)共 7个时期中的表达模式。结果表明，光合通路上的蛋白CABl、OEEl、SBPase在冀豆17和冀nf58的2周叶片中的表达量高于双亲，而在冀豆17叶和荚其他时期的表达量高 于双亲或早5241，在冀nf58叶和荚其他多数时期的表达量低于双亲。但两者的光合速 率均高于双亲，这说明可能这些蛋白在前期叶片中含量的变化产生的影响较大，随着蛋III万方数据白的累积，含量变化产生的影响越来越小。 本实验还设计了CABl、OEEl、LOX及过氧化氢酶1(CATAl)、超氧化物歧化酶(SOD)的引物，用荧光定量PCR检测这些引物在姊妹品种冀豆17和冀nf58及双亲 Hobbit，早5241中的差异表达。结果发现不同基因在不同品种中的表达存在差异，引物 CABl在冀豆17和冀nf58中的表达量高于Hobbit低于早5241，引物OE