马陆共生放线菌及其抗真菌活性物质的分离鉴定-生物工程专业毕业论文.docxVIP

Classified Classified Index： Code： 10224 Confidential：no N0．： 1Dissertation for the Professional Master Degree Sreening and Identification of Symbiotic Actinomycetes from Kronopolites svenhedind Verhoeff and Antifungal Active Substances Candidate：Liu HUi Supervisor：Wang Xiangj ing and Wang Jidong Degree Category：Master of Engineering College：School of Life Science Research Field：Biological Engineering Study Mode：Full--time Harbin China June 2015 万方数据 皇曼詈鲁詈詈詈量曼詈詈詈詈詈詈詈詈量詈詈詈吕鼍量兽鲁曹喜鲁詈量曼曼詈詈詈鲁詈篁詈詈曼曼詈量詈詈置皇詈量詈量暑曼詈詈詈!鲁葛置詈詈詈詈鲁詈皇皇詈曼皇曼II皇皇喜昌昌==；；甬_—·～暑詈 皇曼詈鲁詈詈詈量曼詈詈詈詈詈詈詈詈量詈詈詈吕鼍量兽鲁曹喜鲁詈量曼曼詈詈詈鲁詈篁詈詈曼曼詈量詈詈置皇詈量詈量暑曼詈詈詈!鲁葛置詈詈詈詈鲁詈皇皇詈曼皇曼II皇皇喜昌昌==；；甬_—·～暑詈目录 』Y舢舢2舢7舢7舢1㈣5舢7舢8删 目 录 摘要 ．．I 英文摘要 ．III l前言 1 1．1植物真菌病害防治现状 ．1 1．2微生物源抗生素筛选方法 ．．1 1．3昆虫共生放线菌及其代谢产物 ．．2 1．4马陆 4 1．5研究的意义和内容 ．5 1．5．1意义 ．．5 1．5．2内容 ．．5 1．6课题来源 ．6 2材料与方法 7 2．1实验材料 一7 2．1．1样品 一7 2．1．2供试真菌 ．．7 2．2试剂与仪器 ．7 2．2．1主要试剂 7 2．2．2主要仪器 ．．7 2．3主要培养基 ．8 2．3．1分离培养基 8 2．3．2传代培养基 。9 2．3．3菌丝体培养基 9 2．3．4生测培养基 ．．9 2．3．5生理生化培养基 9 2．3．6形态观察培养基 ．10 2．3．7发酵培养基 10 2．4共生放线菌分离纯化 ． 10 2．5放线菌菌株对病原真菌活性检测 ．10 2．5．1放线菌菌株对病原真菌活性初测 ．．10 2．5．2放线菌菌株对病原真菌活性验证 ．．11 2．6代谢产物分离纯化与鉴定方法 11 2．6．1分离纯化方法 ．11 2．6．2鉴定方法 ．11 万方数据 东北农业大学工程硕士学位论文2．7放线菌分类学鉴定 东北农业大学工程硕士学位论文 2．7放线菌分类学鉴定 11 2．7．1形态、培养特征 ． 11 2．7．2生理生化实验 ．12 2．7．3化学分类鉴定 13 2．7．4分子水平鉴定 16 3结果与分析 19 3．1马陆共生放线菌的分离结果 19 3．2菌株抗真菌活性初测结果 19 3．3 NEAU．ML8的初步鉴定、发酵及代谢产物研究 ．20 3．3．1 NEAU-ML8的16S rRNA序列测定及系统进化分析 20 3．3．2 NEAU．ML8抗真菌活性验证 ．24 3．3．3 NEAU．ML8的发酵 25 3．3．4 NEAU．ML8代谢产物分离提取 ．25 3．3．5 NEAU．ML8代谢产物结构鉴定 ．．26 3．4菌株NEAU—MLl2的多项分类学鉴定结果与分析 一27 3．4．1 16S rRNA序列测定及系统进化分析 ．27 3．4．2形态及培养特征 3 1 3．4．3生理生化特征 ．3 l 3．4．4菌株化学成分鉴定 ．32 3．4．5分子水平分析 36 4讨{仑 ．．38 5结论 ．．39 致 谢 ．．40 参考文献 4l 附 录 ．．45 攻读硕士期间发表的学术论文 ．．48 II 万方数据 CONrENTSCoNTENTS CONrENTS CoNTENTS Abstract in Chinese ．I Abstract in English ．．III 1 Introduction ． ．．1 1．1 The current situation of prevention of plant fungi disease 1 1．2 Screening method of the microbial antibiotics ．1 1．3 Metabolites research of insects symbiotic actinomycetes 2 1．4 Millipede