螺旋藻的优化培养与抗肿瘤作用初探-发酵工程专业毕业论文.docxVIP

摘 摘 要 螺旋藻因其富含蛋白质、多糖、不饱和脂肪酸、维生素、矿物质等多种营养 成分，而被FAO和WHO分别誉为“21世纪最理想的食品和“人类21世纪 的最佳保健品。现今的工业化生产仅以螺旋藻的生物量为指标，各种活性成分 的产量低，远不能满足市场需求。而螺旋藻代谢产物与培养环境密切相关，故本 课题研究了营养盐、光照、温度和植物生长调节剂对螺旋藻生物量、蛋白、胞内 多糖(intracellular polysaccharide，IPS)、胞外多糖(extraceUular polysaccharide， EPS)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutases，SOD)含量的影响，以期找到 高产各种成分的螺旋藻的最佳培养条件。同时，初步研究了螺旋藻EPS、IPS和 PC对Hela细胞的抑制作用和机理。 研究结果表明，当C、N、P、NaCl的浓度(g／L)配比为A(18，2．5，O．5，1．O)， 生物量提高了O．69倍；B(14，2．5，0．5，O．5)，EPS提高了O．49倍；C(10， 2．5，0．8，1．5)时，IPS提高了0．71倍；D(18，2．5，O．2，1．5)，蛋白含量提高 了O．33倍。极大螺旋藻438的最适培养条件为：光强4000 lux～5000 lux，温度 30～35℃，蛋白和IPS积累的条件与螺旋藻最适生长条件一致。对极大螺旋藻生 长不利的温度、光照条件，会促进螺旋藻EPS的分泌和SOD的活性，即高温和 弱光更利于胞外多糖的积累，低温和强光显著提高SOD酶活力。低浓度植物生 长调节剂显著促进了螺旋藻的生长和蛋白的含量，高浓度对其生长有抑制作用。 但高浓度有利于EPS的产生，提高了SOD酶活力。此研究结果确定了螺旋藻生 长和有利于多糖、蛋白质和SOD累积的最佳培养条件，为通过优化培养条件， 调控活性物质提供了理论依据。 体外实验证明IPS、EPS和PC对Hela细胞增殖都有抑制作用，且存在明显 的剂量效应。三者抑制率随浓度的增加而升高，在最佳剂量80 pg／mL、100 pg／mL、 1201xg／mL的作用下，抑制率分别达到为47．92％、42．95％、31．22％。采用Caspase．3 试剂盒检测它们对Hela细胞Caspase．3的活性的影响，发现经过36h、24h、12h 后Caspase一3活性达到最高，分别为对照组的4．06倍、6．64倍、5．70倍。推断其 抗肿瘤的机制可能是通过启动Caspase途径从而诱导HeLa细胞的凋亡。 关键词： 螺旋藻；培养；多糖；抗肿瘤；Caspase．3 ABSTRACTSpirulina ABSTRACT Spirulina were hailed aS“the perfect food in the 21 st century’’and‘‰e optimal health product in the 2 1 st century’’by FAO and WHO due to its nutritional value and the ability to produce valuable chemical compounds，such as protein，polysaccharide， unsaturated fatty acids，vitamins，ere．In recent years，there is a great market demand for SpiruIina．The biomass was consideed as the sole indicator in the current culture， SO the ompm of active ingredient is far from satisfying the needs of the market． Microalgal biomass and metabolites are close related to its culture conditions． Therefore，it is significant to optimize the cultural conditions of spirulina for realizing the high biomass and achieving nutritional ingredients from Spirulina for different purpose．The effects of medium，temperature，light intensity and phytohormones on the growth and the metabolites of protein，intracel