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;1.明确细胞工程技术的原理
(1)植物组织培养:细胞的全能性。
(2)植物体细胞杂交:细胞的全能性、细胞膜的流动性。
(3)动物细胞培养:细胞的增殖。
(4)体细胞核移植:动物细胞核的全能性。
(5)单克隆抗体的制备:细胞膜的流动性、细胞的增殖。
(6)动物细胞融合:细胞膜的流动性。;2.理清植物组织培养的流程;提醒 (1)条件:无菌、离体。
(2)培养基组成:无机营养、有机营养、激素、琼脂。
(3)植物组织培养中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压。
(4)植物组织培养的目的不同,培养阶段也就不同:
①若生产人工种子,则培养到胚状体阶段;
②若提取细胞产品,则一般培养到愈伤组织阶段;
③若培育新个体,则应培养到试管苗阶段。;3.理清植物体细胞杂交技术
(1)酶解方法:用纤维素酶和果胶酶处理。
(2)促融方法:①物理法:离心、振动、电激等;②化学法:聚乙二醇(PEG)。
(3)植物体细胞杂交即将不同种的植物体细胞,在一定条件下融合成杂种细胞,并把杂种细胞培育成新的植物体的过程,不管是染色体数、基因型还是染色体组数都采用直接相加的方法。;4.理清动物细胞培养流程;提醒 (1)动物细胞培养中两次使用胰蛋白酶的作用不同:
第一次:处理剪碎的组织,使其分散成单个细胞;
第二次:使贴壁生长的细胞从瓶壁上脱落下来。
(2)传代细胞的特点
传代培养到10代以内的细胞核型稳定,10~50代时部分细胞核型发生变化,50代以后遗传物质可能发生变化。
(3)原代培养与传代培养的区别
区分原代培养和传代培养的关键是是否分瓶培养。贴壁生长到一定程度需要用胰蛋白酶处理,然后再分瓶培养,让细胞继续增殖,这样的培养过程通常称为传代培养。;(4)动物细胞培养的条件
①无菌、无毒的环境;②特殊营养:血清、血浆;③适宜的温度和pH;④气体环境:含95%空气加5%CO2的混合气体。;5.理清动物体细胞核移植;6.关注制备单克隆抗体常考点
(1)3种细胞特点不同
①免疫后的B淋巴细胞:能分泌抗体,不能大量增殖。
②骨髓瘤细胞:能大量增殖,不能分泌抗体。
③杂交瘤细胞:既能分泌抗体,又能大量增殖。
(2)2次筛选目的不同
第一次筛选:利用特定选择培养基筛选,获得杂交瘤细胞,即AB型细胞(A为B淋巴细胞,B为骨髓瘤细胞),该细胞既能分泌抗体又能大量增殖,筛选掉A、B、AA、BB型细胞。
第二次筛选:利用多孔培养皿和抗原—抗体杂交法筛选,获得产生特异性抗体的杂交瘤细胞。;1.(2018·全国Ⅲ,38)2018年《细胞》期刊报道,中国科学家率先成功地应用体细胞对非人灵长类动物进行克隆,获得两只克隆猴——“中中”和“华华”。回答下列问题:
(1)“中中”和“华华”的获得涉及核移植过程,核移植是指__________
____________________________________________。通过核移植方法获得的克隆猴,与核供体相比,克隆猴体细胞的染色体数目_____(填“减半”“加倍”或“不变”)。;1;1;1;1;2.(2013·全国Ⅱ,40)甲、乙是染色体数目相同的两种二倍体药用植物,甲含有效成分A,乙含有效成分B。某研究小组拟培育同时含有A和B的新型药用植物。
回答下列问题:
(1)为了培育该新型药用植物,可取甲和乙的叶片,先用_______酶和_____酶去除细胞壁,获得具有活力的__________,再用化学诱导剂诱导二者融合。形成的融合细胞进一步培养形成______组织,然后经过____________形成完整的杂种植株。这种培育技术称为_______________
______。;1;1;1;1;1;1;1;1;1;1;1;1;1;1;1;1;1;1;5.(2018·福州高三下学期质检) 莴苣易受软腐病菌的感染,野生甘蓝具有软腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线处理窝苣原生质体可使其染色体片段化,并丧失增殖能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的野生甘蓝原生质体融合,以获得抗软腐病杂种植株。流程如下图所示:;解析 过程①表示原生质体的制备,要用纤维素酶和果胶酶去掉植物细胞的细胞壁。;(2)过程②后,在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的________存在,这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。进一步对杂种植株进行____
_____接种实验,可筛选出具有高抗性的杂种植株。;解析 用于融合的两个细胞,一个是莴苣的叶肉细胞,一个是抗性甘蓝的根部细胞,其中供体细胞特有的结构是叶绿体,可通过观察叶绿体的有无作为初步筛选杂种细胞的标志。进一步对杂种植株进行软腐病菌接种实验,可筛选出具有高抗性的杂种植株。;为达到上述目的,用限制酶处理后,在A1片段与N基因、N基因与A3片段间要有_______________。要使改造后的A基因能表达出N基因所编码
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