黄瓜性别分化的研究-蔬菜学专业毕业论文.docxVIP

摘要黄瓜是研究植物性别分化的经典材料，对黄瓜进行性别分化研究，具有重要的 摘要 黄瓜是研究植物性别分化的经典材料，对黄瓜进行性别分化研究，具有重要的 理论价值和实践意义。本研究以强雄性系黄瓜ZH．20和全雌性系黄瓜GYI为材料， 对黄瓜性别分化和表达机理进行了研究。 通过石蜡切片对黄瓜花芽分化和雌、雄花的发育进行了详细的形态学观察。结 果表明黄瓜雌、雄花的发育过程可细分为10个时期。黄瓜单性花的分化和发育过 程经历了无性期、两性期和单性期。两种性器官原基在发育的起始都出现，在两性 期(时期5)之前雌、雄花之间不存在明显的形态学上的差异，花芽从两性期开始 进-步分化，雌花花芽中心凹陷形成下位子房，雄花雄蕊体积快速增大，最终发育 形成单性的雌、雄花。 在黄瓜性别分化形态学研究的基础上，进一步考察了单性花中未形成有功能器 官的相反性别原基的发育。通过形态学，组织化学，同工酶和蚩白质电泳等方法分 析了黄瓜雄花t扎0皮的发育状况，结果发现黄瓜雄花心皮能不断地进行细胞分裂， 体积也不断增大，心皮中RNA含量较为丰富；雄花心皮在发育后期出现特化的组 织结构，至雄花开花期时，形成类似雌花胎座的结构，但没有分化出胚珠；雄花心 皮在不同发育时期过氧化物同工酶和酯酶同工酶谱带和表达量均存在差异，发育后 期仍能合成新的蛋白质，进一+步表明在成熟的雄花中心皮不再处于原基状态。这些 结果都表明雄花中的心皮处于不断的发育之中，但其发育模式与雌花，n的心皮有着 明显的差异。 采用RT—PCR技术克隆到黄瓜亚精胺合成酶基因长为297的cDNA片断，结合 3．RACE。5一RACE技术，拼接后获得了全长为1398bp的eDNA(CsSPDS)，该基因具 有一个951个碱基的开放测读框(0RF)，编码长为317个氨基酸残基的蛋白质。 CsSPD8的氨基酸序列与其它己知的亚精胺合成酶具有高度的同源性，其与咖啡娅精 胺合成酶同源性最高(identity，87％)。不同器官杂交表达分析表明CsSPBS丰要 在幼根、幼叶和花芽等快速牛长发育的组织中表达。我们还分析了乙烯利处理后从 雄向雌的性逆转过程中CsSPDS的表达状况，结果表明三叶期黄瓜茎尖在处理后2 小时CsSPDS表达量降低，处理后4小时开始增加，到8小时时达到最高，之后‘ 直高于未处理组。并讨论了乙烯fj多胺的相互作用及其与黄瓜性别分化的关系。 关键词：黄瓜；形态学；心皮：业精胺合成酶基因；多胺；乙烯；性别分化 第一章前言植物的性别分化是一种特殊的器官发生现象，即雄蕊或雌蕊的发生，从广义的 第一章前言 植物的性别分化是一种特殊的器官发生现象，即雄蕊或雌蕊的发生，从广义的 角度包括雌、雄性别决定和配子体的分化、发育与成熟的过程。性别分化作为植物 个体发育的一个重要阶段，具有复杂、多样性的特点，与动物的性别研究相比，植 物的性别分化研究起步较晚，研究也不够深入。但无论在理论上，还是在应用上这 一研究都有重大意义。近年来，有关性别分化和表达机理的研究一直是生命科学领 域的研究热点之‘‘。 大多数植物种类产生含雄蕊和雌蕊的两性花(72％)，也有一些种类产生只含雄 蕊或雌蕊的单性花(10％)，只有约4％的被子植物为雌雄异株0,2】。根据其开花特性 可分为雌雄同花，雌雄异株和雌雄同株植物。雌雄同株植物由于不同性别的花在同 ·植株上发牛，其个体中除了存在雌、雄发育程序外，还同时存在雌、雄基因及信号， 基因、信号和标记物部分混合而使研究系统复杂化．因此雌雄同株植物性别分化研 究比雌雄异株植物更难，其性别分化机理研究是所有高等植物中最难的“。 。以瓜类 作为雌雄同株植物性别分化研究的试验系统，进行瓜类性别分化与表达机理的研 究，有助于揭示雌雄同株植物性别分化的机理以及植物的生长发育规律，具有较大 的理论价值。黄瓜(Cucumis sativusL．)雌雄同株异花，其性别分化容易受植物激 素和其他环境冈素影响，是研究植物性别分化的经典材料【3-5J。同时，黄瓜为重要的 经济作物，在性别分化研究的摧础上进行性别的早期鉴定和人为控制性别，在黄瓜 的栽培和育种上都有着相当重要的实践意义。人们已经对黄瓜性别分化进行了广泛 的研究。 分子水平上的研究表明，植物的性别分化就是性决定基阕在诱导信号等作川 下，发生去阻遏作用，使特异基因选择性地表达，从而实现性别分化程序表达的过 程。根据这‘思路，可以把性别分化研究分为三个层次，即分化程序、诱导信号和 性决定基网h”。 1植物性别分化程序 1．1单性花的性别决定与器官发生原理 性别分化过程的形态学研究表明，大多数植物种类单性花的性别决定是由性器 官原基的选择性诱导或败育引起的。两种性器官原基在发育的起始都出现，但其中 -种原基在特定的阶段发育停滞(a仃eSt)，这种发育停滞或选择性败育在不